Распределение ферментов в клетке


 

Распределение ферментов по субклеточным органеллам изучают после предварительного фракционирования клеточных гомогенатов путём высоко- скоростного центрифугирования, определяя содержание ферментов в каждой фракции (рис. 4.1.1).

Рис. 4.1.1. Схема разрушения клеток

Ни одна из фракций не представляет собой чистые органеллы. Маркерный фермент или химический компонент ‒ это тот компонент, который присутствует практически только в составе данного типа органелл. Другими словами, маркер служит индикатором присутствия или отсутствия фракций тех органелл, в составе которых он находиться (табл. 4.1.1).

Локализацию данного фермента в ткани или клетки часто удаётся установить in situ гисто-химическими методами. Для этого тонкие (от 2 до 10 мкм) срезы замороженной ткани обрабатывают раствором субстрата, к которому специфичен данный фермент. В тех местах, где находится фермент, образуется продукт, катализируемый этим ферментом реакции.

Если продукт окрашен и нерастворим, он остаётся на месте образования и позволяет локализовать фермент. Гистоэнзимология даёт наглядную и, в известной мере физиологическую картину распределения ферментов в компартментах клетки.

Большинство ферментов имеют внутриклеточную локализацию и неравномерное распределение в организме. Ферменты определённого метаболического пути, как правило, находятся в одном компартменте клетки. Особенно важно разделение метаболических путей на анаболические и катаболические процессы, которые являются противоположно направленными.

 

Таблица 4.1.1

Маркерные ферменты,

определяемые при субклеточном фракционировании

Фермент Субклеточные фракции
ДНК-полимераза ядро
Сукцинатдегидрогеназа митохондрии
Цитохромоксидаза митохондрии
Глюкоза-6-фосфатаза ЭПР
Кислая фосфатаза лизосомы
Рибонуклеаза лизосомы
Каталаза пероксисомы
Уратоксидаза пероксисомы
5′-Нуклеотидаза плазматическая мембрана
Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа цитозоль
Лактатдегидрогеназа цитозоль
Фосфофруктокиназа цитозоль

 



Дата добавления: 2020-10-01; просмотров: 513;


Поиск по сайту:

Воспользовавшись поиском можно найти нужную информацию на сайте.

Поделитесь с друзьями:

Считаете данную информацию полезной, тогда расскажите друзьям в соц. сетях.
Poznayka.org - Познайка.Орг - 2016-2024 год. Материал предоставляется для ознакомительных и учебных целей.
Генерация страницы за: 0.008 сек.