Определение группы таннинов

1. Реакция Стиасни (с 40% раствором формальдегида и конц. HCl). Конденсированные дубильные вещества образуют осадок кирпично-красного цвета.

К 1 мл экстракта добавляют 0,5 мл 40% раствора формальдегида и по каплям вносят в пробирку концентрированную соляную кислоту.

2. Бромная вода (5 г брома в 1 л воды). В случае присутствия конденсированных дубильных веществ образуется оранжевый или желтый осадок.

К 1-2 мл испытуемого раствора прибавляют по каплям бромную воду до появления в растворе запаха брома.

3. Окрашивание с солями трёхвалентного железа или железоаммонийными квасцами.

К 1 мл испытуемого раствора добавляют 0,5 мл раствора соли железа (III) или железоаммонийных квасцов.

При добавлении солей трёхвалентного железа появляется окрашивание с таннинами:

- чёрно-синее (дубильные вещества гидролизуемой группы, являющиеся производными пирогаллола);

- чёрно-зелёное (дубильные вещества конденсированной группы, представляющие собой производные пирокатехина).

4. Реакция, позволяющая обнаружить пирогалловые танниды.

К 1 мл испытуемого раствора добавляют 0,5 мл 10% раствора железоаммонийных квасцов и 0,5 мл 10% раствора ацетата натрия.

Присутствие пирогалловых таннидов можно обнаружить в фильтрате путём прибавления железоаммонийных квасцов и ацетата натрия – фильтрат окрашивается в фиолетовый цвет.

5. Свободная эллаговая кислота.

К 1 мл исследуемого раствора добавляют нескольких кристаллов нитрита натрия и 3-4 капель ледяной уксусной кислоты.

Свободная эллаговая кислота даёт красно-фиолетовую окраску.

6. Для обнаружения связанной эллаговой кислоты (или гаксаоксидифеновой). При наличии в растворе связанной эллаговой кислоты развивается кармино-красная окраска, переходящая в синюю.

К 1 мл исследуемого раствора добавляют 0,5 мл 0,1 н. раствор серной (или соляной) кислотой.

7. Дубильные вещества с белками создают непроницаемую для воды пленку (дубление). При добавлении к дубильным веществам белка, например, куриного яйца, происходит частичная денатурация белков. Поэтому танины на слизистых оболочках и раневых поверхностях образуют защитную пленку.

К 1 мл исследуемого раствора добавляют 1 мл водного раствора белка куриного яйца.

8. Дубильные вещества осаждаются ацетатом свинца (II).

К 4-5 мл исследуемого раствора добавляют 1-2 мл 10% раствора ацетата свинца (II) и 1-2 мл 10% раствора уксусной кислоты. С дубильными веществами образуется белый осадок.

Образовавшийся осадок отфильтровывают и в фильтрате определяют содержание конденсированных дубильных веществ: добавляют 1-2 мл 1% спиртовой раствор железоаммонийных квасцов – появляется черно-зелёное окрашивание или выпадает белый осадок, растворимый в ледяной уксусной кислоте.

Реакция с 1% спиртовым раствором железоаммониевых квасцов является фармакопейной, проводится с отваром из сырья – кора дуба, корневище змеевика, соплодия ольхи, плоды черники, а также непосредственно в сухом сырье (кора дуба, кора калины и др.).