Определение органических компонентов

1. Белки и мочевина.

Докажите, что в составе мочи отсутствуют белки (ксантопротеиновая реакция).

Ксантопротеиновая реакция. К 1 мл исследуемого раствору добавьте 5-6 капель концентрированной HNO₃ до появления белого осадка, при нагревании окрашивающегося в жёлто-оранжевый цвет. Окраска возникает в результате нитрования ароматических колец аминокислотных остатков белка (тирозина и триптофана). При добавлении к охлажденному содержимого пробирки избытка щёлочи (25% раствор аммиака или 30% раствор гидроксида натрия) появляется оранжевое окрашивание, обусловленное образованием солей нитроновых кислот с хиноновой системой сопряженных двойных связей, например:

2. Мочевая кислота.

Исследуйте раствор при помощи концентрированной азотной кислоты. Выпадает осадок соли азотной кислоты.

3. Кетоновые тела.

Проводят пробу Люголя.

В пробирку вносят 1 мл мочи, 10 капель 10%-ного раствора гидроксида натрия и несколько капель йода в йодиде калия (раствор Люголя) и наблюдают образование желтого осадка йодоформа. Аналогичную реакцию проводят с мочой.

4. Лактоза.

К 2 мл исследуемого раствора приливают 1 мл 25% раствора аммиака и 4-5 капель 10% гидроксида натрия, нагревают на водяной бане при температуре 60-70 °С. В присутствии лактозы появляется розовое окрашивание. Глюкоза дает жёлтое окрашивание.

5. Жёлчные кислоты.

Определяются пробой Петенкофера.

В пробирку налейте 1 мл раствора желчных кислот, разбавленных в 10 раз (желчь из аптеки), добавьте 3-4 капли 5% раствора сахарозы и по каплям, сильно наклонив пробирку (держать пробирку почти горизонтально) – 1 мл концентрированной серной кислоты (содержимое пробирки не взбалтывать!). Пробирку оставить на 5-10 мин. в штативе. При наличии в исследуемом растворе желчных кислот на границе жидкостей образуется красно-фиолетовое кольцо.

Проба основана на образовании окрашенного продукта при взаимодействии желчных кислот и оксиметилфурфурола, который образуется из сахарозы при действии концентрированной серной кислоты:

6. Креатинин.

При определении креатинина в моче к 1 мл мочи приливают 0,5 мл 10% раствора гидроксида натрия и 1 мл насыщенного раствора пикриновой кислоты. Смесь тщательно перемешивают. Развивается оранжевое окрашивание.