Определение содержания кальция в молоке

Соединения кальция составляют приблизительно 1/5 общего количества минеральных веществ молока. В женском молоке содержится в среднем 340 мг/л кальция, ко­ровьем – 140 мг/л, кобыльем – 800-850 мг/л.

Молоко – важный источник кальция и фосфора в питании не только детей, но и взрослых. 78% кальция молока представлено неорганическими солями, 22% соединено с белком казеином.

Кальций участвует в процессе свертывания крови. Он является активатором и ингибитором ряда ферментов (активирует лецитиназу, аденозинтрифосфатазу, угнетает действие енолазы, дипептидазы и других ферментов).

Содержание кальция в сыворотке крови определяют с помощью простого и быстрого метода де-Ваарда. Кальций осаждают в виде щавелевокислой соли (оксалата кальция). Осадок растворяют в серной кислоте, при этом освобождается эквивалентное количество щавелевой кислоты, которое оттитровывают перманганатом калия.

Реакции протекают по следующим уравнениям:

Количество перманганата калия, израсходованное на титрование, эквивалентно содержанию кальция во взятом для исследования объёме сыворотки. 1 мл 0,01 н. раствора КМnO₄ соответствует 0,2 мг кальция.

Оборудование: центрифуга – 1 шт., бюретка на 25 мл – 1 шт., чашка Петри – 1 шт., стеклянная воронка (для заполнения бюретки) – 1 шт., коническая колба на 100 мл – 1 шт., химический стакан на 50-100 мл – 2 шт., мерные пипетки на 1 мл, 5 мл, 10 мл – по 2 шт., мерный цилиндр на 25 мл или 50 мл – 1 шт., стеклянная воронка (для фильтрования) – 1 шт., бумажные фильтры «белая лента», стеклянная палочка – 1 шт., пипетка для удаления жидкости с осадка – 1 шт.

Реактивы: молоко, 4% раствор оксалата аммония, 2% раствор аммиака, 1 н. раствор серной кислоты, 0,01 н. раствор перманганата калия.

Ход работы.1. Молокораз­водят в 10 раз: в химический стакан помещают 1 мл молока и 9 мл дистиллированной воды, тщательно перемешивают.

2. В одну центрифужную пробирку наливают 1 мл разведенного молока, в другую – 1 мл воды. В обе пробирки наливают по 0,5 мл 4%-ного раствора оксалата аммония, перемеши­вают и оставляют на 30 мин., после чего центрифугируют 10-15 мин. (2500 оборотов в минуту).

3. Прозрачную жидкость над осадком осторожно отсасывают с помощью стеклянного капилляра или декантируют, стараясь не взмутить осадка.

4. В обе пробирки приливают по 4 мл 2%-ного раствора аммиака для отмывки от избытка ща­велевокислого аммония и снова центрифугируют в тече­ние 8-10 мин. Промывку осадка производят 2 раза. Надосадочную жидкость осторожно отделяют от осадка декантацией. Осадок щавелевокислого кальция нерастворим в щелочной среде, но хорошо растворяется в раст­ворах минеральных кислот.

5. В обе пробирки прибавляют по 1 мл 1 н. раствора серной кислоты и размешивают стеклянными палочками, не вынимая их из пробирок до полного растворения осадков.

6. Содержимое пробирок переносят в конические колбы на 50 (100) мл, добавляют по 3 мл дистиллированной воды. Колбы ставят на 3-4 мин. в горячую водяную баню при 80^оС.

7. Горячие растворы титруют из бюретки 0,01 н. раствором перманганата калия до появления слабого розового окрашивания, сохраняющегося в течение 1 мин.

Расчёты.Содержание кальция в молоке (мг/л) х вычисляют по формуле

х =

где О – количество 0,01 н. раствора перманганата калия, израсходованного на титрование опытной пробы, мл;

К – количество 0,01 н. раствора перманганата калия, израсходованного на титрование контрольной пробы, мл;

0,2 – количество кальция, соответствующее 1 мл 0,01 н. раствора перманганата калия, мг;

0,01 – коэффициент пересчёта.