Лабораторная диагностика, характер исследуемого материала
Лабораторная диагностика гепатита В проводится только серологическими и молекулярно-генетическим методами. Исследуемым материалом является сыворотка крови. Для выявления антигенов ВГВ и специфических антител применяются ИФА, РИА, РНГА, РОНГА, реакция преципитации в геле (РПГ), встречный иммуноэлектрофорез.
Серологическая диагностика. В организме больных к каждому из вирусных антигенов на разных стадиях заболевания образуются специфические антитела, поэтому основой серодиагностики являются знания о динамике появления и исчезновения основных маркеров ВГБ.
HBsAg является основным маркером заболевания, он появляется в крови в инкубационном периоде (через 4-6 недель после заражения задолго до появления клинических симптомов), постоянно обнаруживается в безжелтушном и желтушном периодах. К концу первого месяца желтушного периода при остром течении болезни он исчезает из сыворотки крови и при последующей сероконверсии это указывает на выздоровление. В то же время длительное присутствие его после заболевания указывает на развитие хронического гепатита или свидетельствует о бессимптомном вирусоносительстве.
Антитела к HBsAgначинают циркулировать через 3-4 месяца после исчезновения из крови HBs-Ag. Они указывают на выздоровление после острого гепатита и появлении протективного иммунитета и сохраняются всю жизнь.
HBeAgпоявляется после HBsAg, максимальная концентрация определяется в конце инкубационного периода и в преджелтушном периоде. С появлением желтухи его количество резко уменьшается и через 2-3 недели от начала заболевания он исчезает. Присутствие HBeAg указывает на активную репродукции вируса и, следовательно, высокую инфекционность крови. Если антиген длительно циркулирует в крови, это указывает на формирование затяжной или хронической формы гепатита.
Антитела к HBeAgпоявляются после спустя 1-2 недели после исчезновения из крови соответствующего антигена и указывают на доброкачественное течение заболевания. У переболевших циркулируют от 2 до 5 лет.
HBeAgнаходится только в ядрах инфицированных гепатоцитов, в свободной крови, как правило, не появляется, его обнаруживают с помощью МИФ.
Антитела к HBeAgциркулируют в крови в желтушный период и в начале реконвалесценции. При уменьшении активности репродукции вируса снижается титр антител, их полное исчезновение указывает на клиническое выздоровление. Особенно показательным и надежным маркером активно-текущего гепатита В является наличие в крови анти-HBcAg IgM.
Антитела к HBeAg класса IgG выявляются как при остром, так и при хроническом гепатите, сохраняются в течение всей и указывают на ранее перенесенный гепатит В (ретроспективная диагностика) или на имеющуюся инфекцию.
Таким образом, основными серологическими маркерами острого гепатита В являются: HBsAg, HBeAg и анти-HBcAg IgM
Молекулярно-генетический метод. Метод применяется как для диагностики заболевания, так и для оценки эффективности противовирусной терапии. В сыворотке крови больных можно обнаружить ДНК ВГВ в острый период заболевания и при хроническом гепатите при помощи ПЦР, реже методом молекулярной гибридизации. Количественный метод ПЦР применяют для определения уровня вирусемии.
7. Особенности вирусологического метода диагностики (культивирование, индикация, идентификация вируса)
ВГВ с трудом культивируется в клеточных культурах. Единственным животным, восприимчивым к вирусу, являются обезьяны шимпанзе. С этим связана сложность изучения жизненного цикла ВГВ.
8. Противовирусный иммунитет
У лиц, перенесших гепатит В с полным выздоровлением, формируется достаточно стойкий специфический иммунитет гуморального и клеточного характера. Перекрестный иммунитет к другим видам вирусного гепатита отсутствует.
Дата добавления: 2021-05-28; просмотров: 360;