Диагностика хеликобактерной инфекции

К инвазивным методам диагностики хеликобактерной инфекции относятся бактериологические, гистологические, цитологические методы и быстрый уреазный тест (CLO-тест). По дан­ным А.Е. Mohamed et al. (1994), применение гистоморфологического метода диагностики дает больший процент идентификации хеликобактерной инфек­ции при язвенной болезни и неязвенной диспепсии, чем уреазный тест или метод выращивания культуры на средах.

Гистологический метод.Прямая гистологическая визуализация HP после серий биопсийных срезов (по Гимзе, гематоксилин и эозином) является зо­лотым стандартом диагностики HP. Преимущество данного метода - широ­кая доступность, удобства хранения и транспортировки, возможность оцен­ки в любое время, любым специалистом, который при необходимости может провести ретроспективный анализ. Гистологический метод позволяет также параллельно провести морфологическую оценку поврежденной слизистой оболочки, устано­вить степень обсемененности материала HP. Основным недостатком метода является необходимость наличия гистологической лаборатории и определен­ные трудности, связанные с интерпретацией и оформлением результатов.

Быстрый уреазный тест.Наиболее широко используемая модификация - так называемый CLO-тест, при котором биоптат помещают в агар, содержа­щий мочевину и индикатор рН. Гидролиз мочевины под воздействием хели­кобактерной уреазы приводит к увеличению рН агара и вызывает изменения окраски в течение от 5-20 мин до 24 ч. Преимуществом данного метода яв­ляется быстрота получения предварительного результата непосредственно в эндоскопическом кабинете. Этот метод прост в выполнении, но бывает положительным при наличии активной инфекции. Принцип метода - обра­зовавшийся благодаря уреазной активности аммиак вызывает сдвиг рН сре­ды в щелочную сторону, что обусловливает окраску индикатора (фенилрота).

Бактериологический метод.Культивирование бактерий HP является очень сложной и дорогостоящей задачей, требующей специального лабораторного оборудования, строжайшего соблюдения всех правил забора, транспортиров­ки, подбора специальных сред и инкубационного окружения и поэтому прак­тически не выполним в настоящее время в большинстве практических меди­цинских учреждений Украины. Однако этот метод является незаменимым при определении чувствительности HP к антибиотикам и другим антибактериальным препаратам, особенно в случаях резистентности к проводимой терапии.

Цитологический метод.С целью диагностики HP готовят мазки-отпечат­ки биоптатов слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки, окрашивают по Гимзе. При световой микроскопии с увеличением в 900 раз исследуется под иммерсией по 9 полей зрения в каждом препарате. При обнаружении HP, которые име­ют характерный вид, проводится количественный подсчет микробных тел по методике Л.И. Аруина (1991) и определяется степень обсеменения. Наличие в препарате до 20 микробных тел соответствует низкой степени обсеменения (+), от 20 до 50 - умеренной (++), свыше 50 - высокой (+++). Специфич­ность и чувствительность цитологического метода 89-97%. Главные достоин­ства метода - высокая чувствительность и специфичность, возможность бы­стро получать результаты (методика занимает до 3 ч). Методика позволяет определять степень инфицирования слизистой оболочки и позволяет в динамике контроли­ровать качество лечения антибактериальными препаратами.

Неинвазивными методами диагностики хеликобактерной инфекции явля­ется серологический метод и дыхательный тест с мочевиной.

Серологический метод. Поскольку колонизация HP вызывает системный иммунный ответ в сыворотке инфицированных появляются антитела классов иммуноглобулинов G и А, направленные против разных бактериальных ан­тигенов. Серологическое определение противохеликобактерных антител сы­воротки крови является самым простым, наименее дорогим и наиболее дос­тупным методом, часто использующимся для первичного скрининга. Так как инфекция HP является хронической и спонтанное ее исчезновение не описано, то положительные серологические тесты у нелеченых пациентов указывают ше текущей инфекции. Недостатком этого метода является то, что даже пешной медикаментозной эрадикации уровень антител, хотя и падает качественная серологическая реакция остается положительной в течении 1,5 года, поэтому для оценки эффективности лечения или диагности-фекции эта реакция непригодна.

Дыхательный тест с мочевиной.Данный метод в настоящее время являет-олее чувствительным и легко выполнимым. Принцип метода основан ito после перорального приема раствора мочевины, меченой ¹³С или ¹⁴С, уреаза HP метаболизирует меченую мочевину и высвобождает меченый углекислый газ, который определяется в выдыхаемом воздухе в течение 10-30 мин. В отличие от серологических анализов дыхательный тест положителен только при наличии текущей инфекции HP. Однако в случаях, если исследования проводить во время или сразу после лечения антибиотиками, препаратами висмута или блокаторами протонной помпы можно получить ложноотрицательные результаты. Поэтому, чтобы избежать ошибок при использовании дыхательного теста для подтверждения эрадикации HP это контрольное исследование должно проводится не ранее чем через 4 нед. после окончания антибактериального лечения.