Пандемические циклы гриппа, вызываемые вирусов типа А

5. Клинические проявления;

Патогенез. Входными воротами инфекции является эпителий слизистых обо­лочек верхних дыхательных путей, куда вирусы гриппа заносятся аэрогенно. Во время короткого инкубационного периода вирус интенсивно репродуцируется в эпителиальных клетках, накапливаясь в количестве, достаточном для появления клинических симптомов. При попадании вирионов непосредственно в альвеолы может развиться первичная гриппозная пневмония. Пораженные эпителиальные клет­ки некротизируются и отторгаются, под действием нейраминидазы оголяются базальные мембраны, усиливается воспалительная реакция, что создает условия для массивного проникновения вирусов в кровь и присоединения вторичной бактериальной инфекции.

Вирусы гриппа легко преодолевают защитные барьеры организ­ма и проникают в кровь. Вирусемия возникает еще в инкубационном периоде и продолжается в течение нескольких дней. Проникшие в кровь вирусы распространяются по организму, заносятся в мышцы, сердце, ЦНС, почки и другие органы. Вирусы вызывают повреждение эритроцитов (действие гемагглютинина), эндотелия капилляров, нередко приводят к нарушению электролитного и кислотно-щелочного баланса. Как следствие, нарушается микроциркуляция, возникают множественные геморрагии и тромбоз, может развиться отек мозга и легких, дистрофия миокарда и другие осложнения.

С первых дней болезни наблюдается интоксикация и лихорадка. Основную роль в их развитии отводят поступающим в кровь биологи­чески активным веществам - серотонину, гистамину, простагландинам, кининам, которые образуются при распаде клеток.

При гриппе угнетается клеточный иммунитет, снижается актив­ность лизоцима, комплемента, пропердина; развивается аллергизация организма. Все это способствует присоединению вторичной бактери­альной инфекции.

Обратное развитие патологического процесса при гриппе и вы­здоровление обусловлено действием противовирусных защитных фак­торов - в большей степени неспецифических, а также специфических, формирование которых запаздывает.

Клинические формы гриппа делят на неосложненные и ослож­ненные (указывая вид осложнений). И те и другие подразделяют на легкие, средней тяжести, тяжелые и крайне тяжелые (гипертоксичес­кие) формы.

6. Лабораторная диагностика, характер исследуемого материала;

Лабораторная диагностика гриппа включает в себя вирусологический, серологический и экспресс-методы. Раннюю и ретроспектив­ную диагностику - проводят для подтверждения клинического диагноза, диффе­ренциации гриппа от ОРВИ другой этиологии и для эпидемиологических целей.

Ранняя диагностика.В ранние сроки заболевания (в первые 3 дня и не позднее 5-го дня болезни) обнаруживают антигены вирусов грип­па с помощью экспресс методов и(или) выделяют и идентифицируют вирус путем вирусологического исследования.

Исследуемые материалы: слизь из носовых ходов и носоглотки, взятая тампонами, путем смывов, методом мазков-отпечатков со сли­зистой нижних носовых раковин. От погибших людей берут участки пораженных слизистых оболочек трахеи и бронхов, кусочки легких.

Экспресс-диагностика. Позволяет установить предварительный диагноз гриппа в течение 2-5 часов. Чаще всего применяют иммунофлюоресцентный метод (прямой и непрямой). Специфические антиге­ны вируса гриппа и внутриклеточные включения выявляют по их яркому изумрудно-зеленому свечению в участках цитоплазмы и ядра инфицированных эпителиальных клеток. МИФ позволяет дифферен­цировать гриппозную инфекцию от других ОРВИ и, при необходимо­сти, выяснять этиологию последних.

Вирусные антигены в смывах из носоглотки обнаруживают так­же методом ИФА, (выявляют присутствие М-белка), в РТГА, РОНГА и других серологических реакциях со специфическими сыворотками.

Разрабатывается методика ПЦР для диагностики гриппа.

Ретроспективная диагностика гриппа заключается в сероло­гическом исследовании парных сывороток, взятых в начале заболева­ния и через 7-14 дней. Повышение титра специфических антител в течение заболевания не менее, чем в 4 раза (у детей младшего возрас­та — в 2 раза) позволяет установить точную этиологию гриппа даже при отрицательных результатах других методов лабораторной диагно­стики (или, если она вообще не проводилась), а также при бессимп­томном или атипичном течение гриппа.

Серологическая диагностика гриппозной инфекции широко при­меняется и для эпидемиологических целей.

7. Особенности вирусологического метода диагностики (культивирование, индикация, идентификация вируса);

Вирусологический метод. Вирусологические исследования сце­лью выделения вируса гриппа проводят преимущественно в период массовой заболеваемости гриппом. Выделенные штаммы идентифи­цируют, изучают динамику их антигенной изменчивости, что помога­ет прогнозированию дальнейших эпидемических волн гриппа, отбору актуальных штаммов, пригодных для изготовления вакцин.

Материалом для выделения вирусов являются носоглоточные смывы и секционный материал после их специальной обработки.

Вирусы выделяют путем заражения куриных эмбрионов и однослойных клеточных культур.

Выделение вируса в куриных эмбрионах. Перед заражением куриных эмбрионов необходимо поместить исследуемый материал в раствор с антибиотиками для уничтожения бактериальной флоры. После этогопрово­дят комбинированное заражение исследуемым материалом 10-11 днев­ных эмбрионов в амниотическую или аллантоисную полости. После 3 дней инкубации при 35°С проверяют присутствие вирусов в амниотической и аллантоисной жидкости с помощью реакции гемагагглютинации с эрит­роцитами кур, морской свинки или человека, устанавливают титр вируса.

Получив вируссодержащий материал - амниотическую и аллантоисную жидкости с высокой гемагглютинирующей активностью, про­водят серологическую идентификацию выделенного вируса спомощью РТГА для установления подтипа или штамма вируса гриппа. Эти реакции ставят с соответствующими диагностическими противогрип­позными сыворотками.

Выделение вирусов в культурах клеток. Осуществляют путем за­ражения нескольких типов культур клеток, чаще используют первич­ные культуры почек человека и некоторых животных. Клеточные культуры инкубируют в течение недели при 33°С, ежедневно регист­рируя изменения монослоя клеток с целью выявления ЦПД (цитопатического действия). При его отсутствии, вирус выявляют с помощью реакции гемадсорбции или гемагглютинации, а также ИФ-методом (иммунофлюоресцентным методом). Далее вируссодержащей культуральной жидкостью заражают куриные эмбрионы, получают аллан­тоисную жидкость с высоким содержанием вирусов, и проводят идентификацию выделенного вируса, как указано выше.

8. Противовирусный иммунитет;

Иммунитет. Человек, перенесший грипп, приобретает стойкий постинфекционный клеточный и гуморальный иммунитет, который отличается своей узкой специфичностью и направлен против сероварианта (штамма) вируса гриппа, вызвавшего данное заболевание. Сле­довательно, противогриппозный иммунитет является подтипо- и штаммоспецифичным. Поэтому появление новых штаммов того же подтипа вируса А даже с очень незначительным дрейфом поверхност­ных антигенов существенно снижает эффективность имеющегося им­мунитета. Дальнейшая антигенная изменчивость того же подтипа вируса, а тем более появление, вследствие шифта антигенов, нового подтипа вируса А, делает человека беззащитным против гриппозной инфекции.

Восприимчивость человека к вирусам гриппа очень высока, осо­бенно при первой встрече с вирусом. Поэтому чаще всего болеют ма­ленькие дети. Грипп у детей протекает тяжелее, чем у взрослых, часто с развитием осложнений.

Высокая ранимость детей обусловлена несовершенством неспе­цифических и специфических механизмов иммунитета, уязвимостью других систем и органов, что связано с анатомо-физиологической не­зрелостью организма.

Пассивный иммунитет, приобретенный ребенком от матери, со­храняется около 6 месяцев при грудном вскармливании и не более 3 месяцев при искусственном.

До повторного появления в популяции людей в 1977 г. вируса гриппа подтипа А (Н1N1) после его 20-летнего отсутствия, считалось, что постгриппозный иммунитет нестоек и сохраняется в течение 2-3 лет. Одна­ко, вызванная этим штаммом пандемия поражала детей и молодых людей, родившихся после 1957 г., и почти не затрагивала людей более старшего возраста. При массовом обследовании этих людей у подав­ляющего большинства из них были обнаружены специфические IgG антитела к вирусу A (H1N1). Эти факты свидетельствуют о сохране­нии постинфекционного иммунитета не менее 20 лет.

Однако, практически, человек часто повторно заболевает грип­пом через 2-3 года, что связано с постоянной антигенной изменчивос­тью и одновременной циркуляцией нескольких типов и подтипов вирусов гриппа.