Лабораторная диагностика

Материал – кровь, моча, слюна, испражнения, ликвор вносят в культуру клеток. Идентификацию проводят в РТГА, РСК, РН, ИФА.

Серологический диагноз: определение АТ-IgМ в ИФА, РИА, РТГА в парных сыворотках больного.

Специфическая профилактика.Для предупреждения заболевания разработана живая аттенуированная вакцина (из штаммов НР V77 или RA 27/3). Так как вакцинный штамм способен размножаться в организме, иммунизацию женщин детородного возраста следует проводить лишь при отсутствии беременности. При этом женцины должны избегать зачатия в течение 3 месяцев.

В Республике Беларусь вакцинация осуществляется живой вакциной тримовакс, в которой содержатся аттенуированные штаммы вирусов кори, краснухи и эпидемического паротита. Детей вакцинируют в 12 месяцев.

20.1.8. Семейство флавивирусов (Flaviviridae)

Семейство Flaviviridae включает 59 видов, из них 31 патогенен для человека.

Флавивирусы включают 4 подгруппы родственных вирусов: клещевого энцефалита; японского энцефалита; лихорадки Денге; вирус желтой лихорадки, лихорадки Западного Нила, энцефалиты долины Муррея и Сент-Луис, омской геморрагической лихорадки, Повассан, Негиши, Кьясанурской лесной болезни.

Эти заболевания протекают в форме тяжелых менингоэнцефалитов и лихорадки с геморрагическими высыпаниями.

Структура вириона и свойства вирусов. Размеры флавивирусов 40-45 нм, имеют (+)РНК, линейную, однонитевую. В составе нуклеокапсида содержится один белок с группоспецифическими антигенными свойствами. На внешней оболочке есть шиповидные выросты, содержащие гликопротеин, который придает гемагглютинирующие свойства, обладает типовой специфичностью.

Вирус Западного Нила - возбудитель лихорадки Западного Нила (ЛЗН) - один из представителей рода Flavivirus, семейства Flaviviridae, получивших наибольшее распространение в странах Африки, Западной Азии и Ближнего Востока. Впервые он был выделен в 1937 г. от лихорадящей женщины в районе Западного Нила (Уганда), в связи с чем и получил свое название. В начале 1950 г. вирус был изолирован от пациентов, птиц и комаров в Египте.

Позднее стало очевидным, что вирус Западного Нила является, вероятно, самым распространен­ным представителем флавивирусов. Он вызывал спорадические случаи и вспышки заболеваний у че­ловека и животных в Европе (в Западном Средиземноморье и южных областях России - в 1962-1964 гг., в Белоруссии и на Украине - в 1970-1980 гг., в Румынии - в 1996-1997 гг., в Чехо­словакии - в 1997 г. и в Италии - в 1998 г.). В 1999 г. появились первые сообщения об обнаруже­нии вируса на территории США.

Основными переносчиками вируса Западного Нила являются комары, питающиеся кровью зара­женных птиц. Несмотря на то что вирус был обна­ружен у 43 видов комаров, чаще всего он встречает­ся у комаров рода Culex.

Основные хозяева вируса - дикие птицы, у ко­торых наблюдается продолжительная и выражен­ная виремия, достаточная для заражения комаров. В тканях и органах зараженных уток и голубей ви­рус сохраняется в течение 20-100 дней. Мигрирую­щие птицы, по-видимому, являются переносчиками возбудителя заболевания в умеренные климатиче­ские зоны Евразии во время весенних перелетов. Значительно реже вирус Западного Нила обнару­живался у млекопитающих (включая мышей, хомя­ков, верблюдов, крупный рогатый скот, лошадей, собак и человека). Однако в отличие от птиц млеко­питающие обычно не участвуют в цикле передачи вируса в экосистеме.

Для вируса Западного Нила характерны два ос­новных типа циркуляции:

- сельский цикл (дикие птицы, обитающие на заболоченных территориях, и орнитофильные комары);

- городской цикл (синантропные, экологически связанные с человеком, виды птиц и комары, пита­ющиеся кровью птиц и человека, преимущественно Culex pipiens/molestus).

Комары приобретают вирус в основном от зара­женных птиц. После инкубационного периода (10-14 дней) вирус Западного Нила может переда­ваться человеку и другим животным во время уку­сов зараженными комарами, поскольку возбуди­тель сохраняется в их слюнных железах.

Размножение вируса в организме человека при­водит к развитию (после 3-6-дневного инкубаци­онного периода) клинических симптомов ЛЗН. Ча­ще всего она протекает как гриппоподобная инфек­ция, сопровождающаяся лихорадкой (от умеренной до высокой), в течение 3-5 дней, головной болью (чаще фронтальной), миалгией, артралгией, слабос­тью, иногда явлениями конъюнктивита, макулопапулярной или розеолезной сыпью (примерно в по­ловине случаев), лимфаденопатией, анорексией, тошнотой, болями в животе, диареей и респиратор­ной симптоматикой. Сравнительно редко (менее 15%) развивается острый асептический менингит или менингоэнцефалит.

Из лабораторных данных можно отметить незначительное увеличение СОЭ и небольшой лейко­цитоз. У пациентов с поражением центральной нервной системы при люмбальной пункции спин­номозговая жидкость прозрачная, с незначитель­ным плеоцитозом и повышенным содержанием белка.

При наличии лихорадки из крови вирус может быть выделен до 10-го дня заболевания у пациентов с нормальной иммунной системой. У лиц с иммуно-супрессией виремия может длиться до 4 нед.

Для ЛЗН характерно полное выздоровление, без длительных или постоянных остаточных явлений. Летальные случаи наблюдаются преимущественно у пациентов старше 50 лет.

Возникновение спорадических случаев и вспы­шек ЛЗН в Европе и США, то есть в регионах, для которых ранее данная инфекция была нехарактер­на, связывают с определенными природными фак­торами (интенсивными дождями с последующими наводнениями, более высокой, чем обычно, темпе­ратурой воздуха, созданием экологической ниши для интенсивного кормления комаров) и антропо-генным влиянием человека на окружающую среду, повышающими плотность популяции переносчи­ков вируса (ирригационные мероприятия).

Высказываются предположения, что при гло­бальном потеплении воздуха возникнут предпо­сылки для более широкого распространения кома­ров, являющихся переносчиками вируса Западного Нила. В связи с этим возникает настоятельная необходимость создания системы слежения за ЛЗН (мониторинг плотности и зараженности комаров, серологический контроль позвоночных животных и подверженных групп населения, а также рутин­ная диагностика заболевания у человека) в вовле­ченных регионах. В частности, в США после вспышки ЛЗН помимо пересмотра и обновления руководства по мониторингу, предупреждению и контролю инфекций, вызываемых вирусом Запад­ного Нила, в ближайшем будущем планируется со­здание национальной программы предупреждения вспышек ЛЗН.

Еще предстоит изучить механизм персистенции вируса Западного Нила в эндемичных райо­нах умеренной климатической зоны Европы. Ос­новная гипотеза, объясняющая сохранение вируса в зимнее время при неблагоприятных климатичес­ких условиях, уже была предложена. Вирус мо­жет персистировать в спящих женских особях ко­маров Culex spp., в трансовариально зараженных потомках Culex spp. или в позвоночных (возмож­но, в птицах и лягушках) с хроническим типом ин­фекции.

Культивирование.Вирусы культивируют в куриных эмбрионах, культурах тканей, где образуются многоядерные клеточные симпласты; в организме белых мышей при заражении в мозг. Флавивирусы имеют цикл репродукции около 20 часов. Адсорбируясь на фосфолипидных или гликолипидных рецепторах клеток вирионы проникают в них путем эндоцитоза. После депротеинизации и синтеза вирусных белков и репликации РНК формируются зрелые вирионы, которые выходят из клетки путем почкования, но только через модифицированные мембраны эндоплазматического ретикулума клетки.