Продукты и материалы, подлежащие исследованию при пищевых отравлениях и порядок направления их в лабораторию

3. Алгоритм бактериологических исследований

при пищевых отравлениях

При подозрении на бактериальную этиологию пищевого отравления в лаборатории санитарно-эпидемиологической станции, а также в лабораториях больниц, по месту госпитализации пострадавших производятся необходимые бактериологические и серологические исследования.

В число исследований входят:

· посев крови пострадавших на гемокультуру (в остром периоде заболевания);

· при подозрении на ботулизм исследуется взятая до введения лечебной противоботулинической сыворотки кровь пострадавших на наличие токсина и определяется его тип путем постановки реакции нейтрализации с диагностическими противоботулиническими сыворотками;

· серологические реакции (по подозрении на сальмонеллез и другие пищевые токсикоинфекции) с сывороткой крови заболевших производятся дважды (в динамике): на 1-3 и далее на 7-10 день заболевания или на 7-10 и далее на 15-18 день. При большом количестве пострадавших серологическому исследованию подвергается кровь наиболее тяжело заболевших, при этом рекомендуется взятие крови у не менее 10-15 человек, а при небольшом количестве больных по возможности кровь всех переболевших.

3.1. Порядок бактериологического исследования

материалов от пострадавших

1. Кровь засевают в питательную среду (Раппопорт и др.) в соотношении 1:10 (5 мл на 45 мл среды). Термостатируют 10 дней при 37 °С, делая высевы на среду Эндо через 18 - 24 часа, на 3, 4, 6, 10 сутки. При наличии роста работают по общепринятой методике.

2. Мочу центрифугируют, засевают осадок в 5 мл хлористо-магниевой среды обычной концентрации (или 10 мл мочи на 10 мл среды двойной концентрации), через 18-20 часов инкубации при 37 °С делают высев петлей на ВСА (48 часов при 37 °С). При наличии подозрительного роста идентификацию проводят по общепринятой методике.

3. Желчь засевают в количестве 5 мл на 45-50 мл МПБ (1:10), помещают на 7 суток в термостат при 37 °С и делают высевы через 18-20 часов и 3, 5, 7 сутки на среду Эндо. При наличии подозрительного роста работают по общепринятой методике.

4. Промывные воды желудка после нейтрализации (1 мл 10-процентной соды на 10 мл пробы) засевают по 0,1 мл на плотные чашечные питательные среды Эндо (Левина), Плоскирева, ЖСА, КА и в среды обогащения (хлористо-магниевая, желчный бульон, солевой бульон, сахарный бульон) в соотношении 1:5-1:10 (1 мл на 4-5 мл среды). Дальнейшее исследование проводят в зависимости от характера роста по общепринятой методике.

5. Рвотные массы после нейтрализации, испражнения.

Готовят на 0,1-процентной пептонной воде или физ. растворе 10- кратные разведения: 10^-1, 10^-3, 10^-5 для исследования на C. perfringens дополнительно: 10^-8, 10^-9, 10^-10 и далее проводят посевы:

· на шигеллы и сальмонеллы: по 0,1 мл из 10^-1 на среды Эндо (Левина), Плоскирева, ВСА и в среды обогащения: по 0,3-1,0 мл из 10^-1 на 2,5-5 мл хлористо-магниевой среды (селенитовой);

· на S. aureus: по 0,1 мл из 10^-3 и 10^-5 на ЖСА;

· на B. cereus: по 0,1 мл из 10^-3 и 10^-5 на желточный агар с маннитом, полимиксином и феноловым красным (ЖАМПФ), при отсутствии - на ЖСА;

· на энтерококки: по 0,1 мл из 10^-3 и 10^-5 на МИС, при отсутствии - на КА;

· на условно-патогенные энтеробактерии: по 0,1 мл из 10^-3 и 10^-5 на Эндо;

· на C. perfringens по 1 мл из 10^-8, 10^-9, 10^-10 в пробирки с 8-9 мл среды Вильсон-Блера;

· на C. botulinum: по 3-5 мл из 10^-1 в 4 флакона (пробирки) с 30-50 мл среды Китт-Тароцци (при отсутствии среды возможно применение среды для контроля стерильности).

Посевы на C. perfringens и C. botulinum проводят только по клинико-эпидемиологическим показаниям, о чем должна быть сделана запись в направлении. Дальнейший ход исследования и идентификацию на все виды возбудителей проводят по общепринятой методике.

3.2. Порядок бактериологического исследования

пищевых продуктов

Готовят исходное разведение продукта 1:10 (для твердых продуктов: 15 г продукта + 135 мл 0,1-процентной пептонной воды или физ. раствора; для жидких продуктов: 10 мл продукта + 90 мл 0,1-процентной пептонной воды или физ. раствора) и из него в 9 мл 0,1-процентной пептонной воды или физ. раствора два дополнительных разведения 10^-3 и 10^-5. При целенаправленном исследовании на C. perfringens дополнительно готовят разведения 10^-8, 10^-9, 10^-10.

Посев в среды обогащения проводят в больших объемах: 25 мл/г цельного продукта (для твердых продуктов необходимо предварительно размельчить в ступке) в 100 мл хлористо-магниевой среды обычной концентрации или 25 мл хлористо-магниевой среды двойной концентрации.

5 мл/г - в 25 мл желчного бульона, 30 мл/г - в 120 - 150 мл среды Китт-Тароцци и т.д.

Исследование на C. botulinum и C. perfringens проводят по клинико-эпидемиологическим показаниям.

Дальнейший ход исследования и идентификацию на все виды возбудителей проводят по соответствующим нормативно-техническим документам.

Контрольные вопросы

Что входит в понятие «расследование пищевых отравлений»?

Какая первоочередная цель при проведении расследования пищевых отравлений?

Как проводятся отборы проб для бактериологических исследований?

Какие продукты и материалы направляют в лабораторию при пищевых отравлениях?

Какой алгоритм бактериальных исследований при пищевых отравлениях?

Какой порядок бактериологических исследований материалов от пострадавших?

Какие среды используют при бактериологических исследованиях пищевых отравлений?

Каких возбудителей пищевых отравлений вы знаете?

Какой порядок бактериологических исследований пищевых продуктов при расследовании пищевых отравлений?

Что собой представляет среда Раппопорт?