А. Бактериологический

Материал: остатки пищи, рвотные массы, промывные воды, испражнения, смывы с предметов
МПБ с 6,5% и 10% хлористого натрия и МПБ с 1% глюкозы	Кровяной МПА	Молочно-солевой агар
Ферментация маннита	МПА МПБ	Микроскопия
Проба на плазмокоагуляцию	Определение фаготипа	Биологическая проба на кошках

Б. Обнаружение стафилококковых энтеротоксинов: непрямой бактериологический, серологический и биологический методы.

В. Энтеротоксин на кошках определяют внутривенным введением материала. Полученный центрифугат или фильтрат стафилококковой культуры прогревают в кипящей водяной бане в течение 30 минут и вводят кошкам в вену уха или бедренную вену в количестве 0,5 мл на 1 кг веса. Наличие рвоты и поноса или только рвоты, наступившей в сроки от 30 минут до 3 часов, указывает на присутствие энтеротоксина.

4. Бактериологическая диагностика пищевой токсикоинфекции,

вызванной B. cereus

Первый этап:бактериоскопия исходного материала (рвотные массы, промывные воды, фекалии, пищевые продукты) и посев исследуемого материала на плотные питательные среды для выделения возбудителя и определения его количества. Для этого пищевые продукты титруют на децепроцентной (0,1%) пептонной воде до 10^-7, фекалии, рвотные массы, промывные воды от 10² до 10⁴. Затем по 0,1 см³ засевают на плотные пита­тельные среды: Пивоварова (ЖСА с полимиксином и ТТХ), Никодемуса (желточно-спиртовой агар) или Чистовича (ЖСА). Температура инкуба­ции составляет 37 °С, но лучше 30 °С. На среде Пивоварова учёт проводят через 48 ч, на средах Никодемуса и ЖСА - через 72 ч. Затем вычисляют индекс возбудителя.

Второй этап:изучение характера роста. На среде Пивоварова коло­нии розовые (могут быть красные) за счёт редукции ТТХ, окружённые зоной лецитиназной активности. На средах Никодемуса и Чистовича колонии цвета среды с зоной лецитиназного венчика вокруг колонии. После оценки роста 3-5 колоний пересевают на скошенный агар и параллельно на мясопептонный бульон, инкубируют при температуре 37 °С в течение 24 ч.

ИдентификацияВ. cereus.

1. Подвижность в раздавленной капле (+).

2. На среде Гисса с маннитом (-).

3. На среде Кларка за 48 часов образует ацетоин (реакция Фогеса-Проскауэра) (+).

4. На кровяном агаре гемолиз (+).

5. Окисление, ферментация глюкозы (++).

6. Каталаза (+).

Для доказательства идентичности выделенной культуры из раз­личных материалов определяют метки.

Определение биоварана среде Гисса:

- лактоза (+/-);

- сахароза(+/^_);

- глицерин (+/-),

- галактоза(+/-);

- дульцит (+/-);

- арабиноза (+/-).

Определение вирулентности:500 КОЕ вводят внутрибрюшинно двум белым мышам массой 10-15 г. На 1-4 сутки мыши погиба­ют, и в органах обнаруживается В. cereus.

Этиологическую роль В. cereus при пищевых отравлениях можно признать (при отсутствии патогенных микроорганизмов) в следую­щих случаях, когда В. cereus:

1. Обнаружен в пищевых продуктах в количествах 10⁵/г (см³) или более.

2. Обнаружен одновременно в рвотных массах, промывных водах, испражнениях в количестве 100 КОЕ/г (см³) и более.

3. Выделен из фекалий у большинства пострадавших.

4. Выделен из фекалий больного только в остром периоде болезни в количестве 100-1000 КОЕ/г и более с последующим исчезнове­нием микроорганизма после выздоровления.

Контрольные вопросы:

В чем суть иммунофлуоресцентного метода диагностики брюшного тифа?

Какие микроорганизмы чаще всего вызывают пищевые токсикоинфекции?

Какие условия способствуют возникновению пищевых токсикоинфекций?

Какие сальмонеллы чаще всего оказываются возбудителями пищевых токсикоинфекций?

Каковы морфологические,тинкториальные, культуральные и биохимические свойства сальмонелл - возбудителей пищевых токсикоинфекций?

Каковы особенности патогенеза пищевых токсикоинфекций?

Какие микробиологические методы используются для диагностики пищевых токсикоинфекций?

Что подлежит исследованию при пищевых токсикоинфекциях?

На какие питательные среды следует сеять материал при пищевых токсикоинфекциях?

Как производится идентификация сальмонелл - возбудителей пищевых токсикоинфекций?

Как производится исследование пищевых продуктов на наличие условно патогенных микробов кишечной группы?

Как производится исследование пищевых продуктов на наличие стафилококка?

Как обнаруживается стафилококковый энтеротоксин?

Какие формы сальмонеллезов бывают у животных?

Каковы эпидемиологические особенности пищевых токсикоинфекций?

Каковы меры предупреждения пищевых токсикоинфекций?

Что такое спорадический сальмонеллез и каковы особенности его эпидемиологии?