Исследования агрегации тромбоцитов в образцах цельной крови
Корпорация «Chrono-log» производит агре-гометры, работающие на образцах цельной цит-ратной крови и использующие электронно-им-педансный и люминесцентный методы детекции (рис. 77). Прибор регистрирует микротоки, протекающие в специальном электродном блоке, при погружении его в различные образцы -цельную кровь, плазму, богатую тромбоцитами (ПБТ), разведенную кровь или во взвесь отмытых тромбоцитов. Первоначальный контакт электродов с образцом приводит к образованию монослоя тромбоцитов. Затем при добавлении индукторов агрегации и других активных агентов происходит постепенная агрегация тромбоцитов на электродах, которая приводит к характерным изменениям электрических свойств системы.
Методом электронного импеданса можно проводить измерения агрегации в условиях, в
которых оптическая агрегация это сделать не может - в гемолизированных, иктеричных и ли-пемичных образцах. Импедансная агрегометрия может быть использована с успехом при исследовании пациентов с синдромом гигантских тромбоцитов, где оптическая агрегометрия приводит к неправильным результатам.
Исследование агрегации на агрегометрах «Chrono-log» проводится очень быстро: для исследования агрегации в 5 мл цельной крови необходимо времени меньше, чем требуется для приготовления плазмы для коагулограммы. При этом методика позволяет выявить большинство видов дисфункции тромбоцитов. Высокочувствительный импедансный метод позволяет очень быстро и точно провести скрининг для выявления болезни Виллебранда на основе рис-тоцетин-агрегации цельной крови (рис. 78). Этот же подход помогает подтвердить синдром Бер-нара-Сулье у детей, быстро найти объяснение длительным кровотечениям у пациентов, принимающих различные противовоспалительные лекарства.
Рис. 77. Агрегометр «Chrono-log»,исследующий агрегацию тромбоцитов на цельной крови электронно-импеданс-ным методом
Рис. 78. Быстрая диагностика болезни Виллебрандаи
врожденных нарушений функции тромбоцитов на агрего-метре «Chrono-log» с цифровым и графическим представлением результатов
Обеспечение диагностики нарушений гемостаза в КДЛ
Наличие на агрегометре люминесцентного датчика позволяет одновременно с агрегацией тромбоцитов исследовать и другие процессы, например секрецию гранул.
В то же время практически все агрегометры корпорации «Chrono-log», как дополнение к им-педансным и люминесцентным каналам, имеют оптические каналы для проведения классической (турбидиметрической) агрегометрии.
Процессы агрегации в цельной крови наиболее приближены к физиологическим условиям in vivo. Именно поэтому достигается высокая достоверность и специфичность результатов исследования, что дает возможность не только
быстро провести необходимую диагностику, но и обеспечить надежную программу мониторинга проводимой терапии в реальном времени. Поскольку импедансная агрегометрия на цельной крови является наиболее адекватным средством для определения гиперагрегации, метод рекомендуется для исследования пациентов с риском тромбоэмболических осложнений. Этот метод более чувствителен и адекватен по сравнению с оптической агрегацией, поскольку измерения происходят в присутствии всех нативных элементов цельной крови, включая эритроциты и лейкоциты.
Тромбоэластография
Тромбоэластография (ТЭГ) - один из первых методов комплексной оценки гемостаза. Тромбоэластография была предложена еще в 1948 г. Гар-тертом (Hartert) и до настоящего времени остается единственным методом, который качественно и полуколичественно позволяет охарактеризовать процесс образования сгустка, его механические характеристики, плотность, стабильность и процесс фибринолиза. В настоящее время метод усовершенствован, он позволяет количественно оценить перечисленные параметры. Модификацию метода с использованием компьютерного анализа данных можно назвать тромбоэластомет-рией (ТЭМ). ТЭГ и ТЭМ могут быть использованы для исследования цельной крови, цельной крови с антикоагулянтами, богатой и бедной тромбоцитами плазмы с цитратом в качестве антикоагулянта.
Принцип ТЭГ: исследуемый образец помещается между двумя поверхностями, на одну из которых подаются вращательно-колебательные движения, а другая соединена с устройством, принимающим и фиксирующим колебания. После добавления в образец активатора свертывания крови начинается образование сгустка. По мере полимеризации фибрина колебания с одной поверхности начинают передаваться на другую и регистрироваться. Получающаяся кривая зависимости амплитуды колебаний от времени характеризует процесс свертывания крови, а позже фибринолиза (рис. 79).
Наиболее важной информацией, которую можно извлечь из кривой ТЭГ (рис. 80), является:
• Время до начала образования фибрина (г-вре-
мя).
• Время формирования сгустка (к-время).
• Максимальная амплитуда (зависит от кон
центрации фибриногена, количества и каче
ства тромбоцитов, взаимодействия фибрина
и тромбоцитов в сгустке).
• Время лизиса тромба.
Метод позволяет исследовать как спонтанную коагуляцию, так и индуцированную активаторами. Применение различных активаторов и реактивов позволяет достичь разных диагностических целей. В качестве дополнительных реактивов могут использоваться гепарин, фибринолитики или их ингибиторы. Изменения ТЭГ, которые отражают наиболее распространенные изменения гемостаза, представлены на рис. 81. Наряду с изменениями, вызываемыми лекарственными препаратами, ТЭГ позволяет идентифицировать тромбоцитопа-тии, гиперкоагуляцию и другие нарушения.
В настоящее время разработаны достаточно компактные тромбоэластографы, которые можно размещать на каталке около постели больного и оценивать процесс гемостаза немедленно после взятия крови, что существенно уменьшает влияние преаналитических факторов. Один из наиболее адаптированных к клиническим исследованиям тромбоэластографов «Rotem Gamma» показан на рис. 82.
Обеспечение диагностики нарушений гемостаза в КДЛ
Обеспечение диагностики нарушений гемостаза в КДЛ
Дата добавления: 2016-08-06; просмотров: 2410;