Автоматизированные коагулометры
Автоматизированные коагулометры существенно улучшили точность и повторяемость результатов коагуляционных тестов, уменьшили влияние человеческого фактора. В настоящее время имеется большой выбор различных приборов для исследования гемостаза, начиная от самых простых, в которых автоматизирован лишь процесс фиксации момента свертывания крови, до сложных машин, требующих лишь установить отцентрифугированные пробирки в штатив и задать программу исследований. В последние годы появляются биохимические анализаторы, в которых предлагаются программы для регистрации коагуляционных тестов методом турбидиметрии по резкому изменению светопропускания в момент свертывания плазмы. Все это значительно расширило возможности оценки гемостаза в клинико-диагностических лабораториях. В то же время исследование гемостаза по-прежнему предъявляет высокие требования к преаналитическому этапу, качеству подготовки проб, квалификации лаборантов, проводящих исследования.
В последние несколько лет в аналитическом подходе к оценке гемостаза, в том числе и из-за внедрения автоматизации, существенно повышены требования к стандартизации. Стандартизация рассматривается как спектр приемов исследования гемостаза, обеспечивающий воспроизводимые в разных лабораториях результаты за счет применения разовых систем взятия крови, аттестованных методов, реактивов, приборной базы, международных стандартов при калибровке, проведения внутрилабораторного контроля качества, участия во внешнем и международном контроле качества и др. Наиболее ярким примером такого подхода является переход от определения нестан-
дартизованного протромбинового индекса к определению международного нормализованного отношения (MHO) при использовании аттестованного по международным стандартам тромбоп-ластина (см. ниже). Однако многие коагуляцион-ные методы плохо поддаются стандартизации, в том числе такой широко распространенный тест, как активированное частичное тромбопластино-вое время (АЧТВ).
В основе регистрации момента выпадения сгустка в коагулометрах используются несколько принципов: механический, турбидиметричес-кий, оптико-механический. Каждый из них имеет свои преимущества и недостатки, которые важно знать при интерпретации результатов исследований (см. ниже).
Ограничения коагуляционных методов:
• Ограниченное время регистрации. Тест дол
жен быть проведен в течение примерно 10-
200 с. Это возможно далеко не для всех ана
лизов.
• Далеко не все компоненты гемостаза можно
исследовать по времени образования сгуст
ка. Компоненты системы фибринолиза, инги
биторы не оказывают прямого влияния на
время свертывания, и их количественная
оценка не поддается исследованию клоттин-
говым методом.
• Метод чувствителен к различным неспеци
фическим внешним воздействиям. Напри
мер, исследование активности ф.VIII клот-
тинговым методом невозможно у пациента,
получающего терапию гепарином или непря
мыми антикоагулянтами, хотя ни те ни дру
гие не оказывают непосредственного влия
ния на этот фактор.
• Метод малочувствителен для определения
повышенной активности компонентов систе
мы свертывания крови.
• Для ряда тестов сложно создать устойчивые
реактивы, удобные для применения в диаг
ностических лабораториях. Существенной
проблемой на этом пути является использо
вание активаторов плазменных факторов, в
частности использование на первом этапе ак
тиваторов протеолитических реакций. Акти
ваторы могут быть нефизиологическими, ко
торые имитируют твердую фазу поверхнос
ти (каолин, целит), или физиологическими
Обеспечение диагностики нарушений гемостаза в КДЛ
(экстракты тканей, очищенные или рекомби-нантные активаторы факторов свертывания). Несколько этапов свертывания требуют не только активаторов, но и кофакторов свертывания, фосфолипидов и ионов Са2+. Для практических целей применяются смеси этих веществ, часто с нестабильными белками, которые иногда трудно очистить и стабилизировать (например, тромбин). В учреждениях с высоким научным потенциалом часто применяются активаторы на основе змеиных ядов. Эти натуральные активаторы зачастую превышают по своим характеристикам даже высокоочищенные и рекомби-нантные активаторы. Они бывают устойчивыми к действию ингибиторов и прямых антикоагулянтов, часто не требуют кофакторов и ионов Са2+. Однако использование таких активаторов ограничено высокой стоимостью и малой доступностью для практических лабораторий.
Дата добавления: 2016-08-06; просмотров: 1750;