Методология исследования
Исследование проведено на двух линиях крыс: Спрег–Доули массой 270–310 г и Вистар–Киото массой 240–290 г, наркотизированных внутрибрюшинным введением уретана (1,2 г/кг массы тела), чтобы оценить чувствительность разных животных к НИЛИ. Методом прижизненной телевизионной микроскопии исследовано 106 пиальных артерий диаметром 83±5 мкм у 5 крыс линии Спрег–Доули и 145
пиальных артерий диаметром 87±6 мкм у 5 крыслинии Вистар–Киото. Для предотвращения свертывания крови использовали гепарин (в/в, 50 ЕД/100 г
массы тела). Через высверленное в черепной кости крысы отверстие удалялась твердая мозговая оболочка, мягкая мозговая оболочка, непрерывно орошаемая теплым (37 °С) физиологическим раствором, микроскопировалась (470×). Запись изображения в память компьютера осуществлялась с помощью устройства видеозахвата, измерение линейных размеров сосудов проводилосьпосле эксперимента с помощью программы для анализа изображений, калибровка измерений осуществлялась стандартным объект-микрометром. В качестве адренергического стимула пиальныхартерий использовали аппликацию на эти сосудыраствора норадреналина в концентрации 2 10–5 г/млв течение 5 минут. Реакцию пиальных артерий нанорадреналин регистрировали через 1 и 5 минут после начала аппликации: учитывали число артерий,изменивших диаметр в ответ на воздействие, и степень изменения просвета сосуда (амплитуда реакции). В каждом опыте предпринимали 2 аппликации: до облучения и после облучения пиальной сосудистой сети гелий-неоновым лазером. Аппликацию раствора норадреналина проводилипутем орошения мягкой мозговой оболочки с использованием инфузионного насоса; система орошения позволяла менять физиологический раствор нараствор норадреналина, и наоборот. Для облучения пиальной сосудистой сети использовали излучение гелий-неонового лазера сдлиной волны 632,8 нм, мощностью 1,7 мВт, плотностью мощности 1,7 мВт/см2, длительность облучения (экспозиция) составляла 5 мин.Излучение гелий-неонового лазера с такими жепараметрами использовали для облучения invitroпроб крови, полученной из сонной артерииот 12 наркотизированных уретаном (в/бр., 1,2 г/кгмассы тела) крыс линии Вистар–Киото. Деформируемость эритроцитов определяли по методу Карабанова, пропуская суспензию эритроцитов через амидный фильтр с диаметром пор5 мкм. Полученную после центрифугирования крови эритроцитарную массу трижды отмывали физиологическим раствором, после чего готовили суспензию эритроцитов в физиологическом растворе c показателем гематокрита 15 об. %. Одну часть суспензии в течение 5 минут подвергали облучению гелий-неоновым лазером, другая служила контролем. Индекс фильтрации эритроцитов определяли по отношению времени прохождения через фильтр суспензии эритроцитов ко времени фильтрации физиологического раствора. Чем больше значение индексафильтрации, тем меньше деформируемость эритроцитов.
Дата добавления: 2017-01-08; просмотров: 1323;