Лабораторная диагностика

Лабораторное обследование больных является важным звеном в диагностике сальмонеллезов. Основой диагностики является бактериологический метод. Для исследования берут испражнения, рвотные массы, промывные воды желудка, кровь, мочу, остатки пищи, а также исходные продукты, использованные для ее приготовления; смывы с различного оборудования и предметов.

В качестве сред обогащения используют селенитовый бульон с аминопептидом, селенитовую среду, среду Мюллера, среду Кауффмана, 20% желчный бульон. Среди дифференциально-диагностических сред для первичных посевов и высевов со сред обогащения выделяют высокоселективные среды (висмут-сульфитный агар или агар с бриллиантовым зеленым), среднеселективные среды (среда Плоскирева) и дифференциально-диагностические (Эндо и Левина). Подозрительные колонии (не менее трех) пересевают в пробирки с одной из комбинированных сред (Олькеницкого, Клиглера, Ресселя) и на скошенный МПА.

Изучают биохимические, морфологические, тинкториальные свойства. Сальмонеллы образуют H₂S, не ферментируют лактозу, подвижны, дают положительную реакцию с метиловым красным, цитратом и на лизин-декарбоксилазу, не образуют индол и не синтезируют уреазу.

С культурами, выросшими на МПА, проводят реакцию агглютинации на стекле с О- и Н-агглютинирующими антисыворотками. По результатам реакции агглютинации ставят окончательный бактериологический диагноз.

Серологические исследования проводят для диагностики и выявления носительства. Применяют РПГА и РА, диагностический титр которой должен быть не менее, чем 1:200. Важное значение имеет нарастание титра антител в динамике заболевания.

При групповых заболеваниях сальмонеллезом используются методы экспресс-диагностики: РИФ, РПГА с антительным диагностикумом. Разработаны методы ИФА для обнаружения антигенов сальмонелл в крови и моче.

Лечение. Патогенетическая терапия сальмонеллезов направлена на дезинтоксикацию, восстановление водно-электролитного баланса и гемодинамики. Антибактериальная терапия при гастроинтестинальной форме малоэффективна. Одной из главных причин этого является преимущественно внутриклеточное расположение микроорганизмов. При генерализованной форме наряду с патогенетической терапией показано этиотропное лечение. Применяют антибиотики группы аминогликозидов (гентамицин), фторхинолоны (ципрофлоксацин) и др. В комплексном лечении сальмонеллезов применяется также поливалентный сальмонеллезный бактериофаг.

Профилактика. Включает ветеринарно-санитарные, санитарно-гигиенические и противоэпидемические мероприятия. В случае возникновения внутрибольничной вспышки сальмонеллеза устанавливается особый режим работы лечебно-профилактического учреждения.

Клебсиеллы

Первое сообщение о капсульных бактериях, вызывающих тяжелые пневмонии, было сделано немецким бактериологом Э. Клебсом в 1875 г. Патогенность для животных была доказана в 1882 г. немецким патологоанатомом К. Фридлендером, который выделил этого возбудителя в чистой культуре. С 1882 г. этот возбудитель был назван Klebsiella pneumoniae или клебсиелла Фридлендера.

В настоящее время доказано, что клебсиеллы вызывают острые заболевания кишечного тракта, пневмонии, бронхиты, менингиты, сепсис, поражают урогенитальный тракт, вызывают внутрибольничные инфекции у новорожденных и т.д.

Таксономия. Семейство Enterobacteriaceae, род Klebsiella, виды: K. рneumoniae, K. оxitoca, K. terrigena, K. planticola. Типовым видом является K. pneumoniae, который играет большую роль в патологии.

На основании анализа ДНК у вида K.pneumoniae выделено 3 подвида: K. pneumoniae, K. ozaеnae, K. rhinoscleromatis.

Общие свойства

Морфология. Короткие толстые палочки, могут иметь эллипсовидную форму, располагаются одиночно, парами или цепочками, грамотрицательны. Образуют капсулы в организме и на средах. Спор и жгутиков не имеют, но есть фимбрии (пили), которые обеспечивают высокую адгезивную способность к клеткам эпителия. Антигены фимбрий высоко иммуногенны.

Культуральные свойства. Факультативные анаэробы. Растут на простых средах, дают рост слизистых, куполообразных колоний. Могут диссоциировать на R и S-формы. На жидких средах – помутнение, могут давать пленку. Оптимум температуры – 35-37⁰С, рН среды – 7,2.

Антигены. Имеет О-АГ – (11 сероваров) и К-АГ – 82 серовара. Серологическое типирование клебсиелл основано на определении К-антигена. Некоторые К-антигены родственны К-антигенам стрептококков, эшерихий, сальмонелл. Обнаружены О-антигены, родственные О-антигенам E.coli.

Факторы патогенности. Сидерофорная система связывает ионы железа и снижает его содержание в тканях организма; плазмида К-88 (фактор колонизации) обеспечивает накопление микроорганизмов в доступных для возбудителя тканях; капсула защищает от фагоцитоза; адгезины, ворсинки обеспечивают тропизм к эпителию; энтеротоксин по механизму действия напоминает токсин энтеротоксигенной кишечной палочки (активирует систему гуанилатциклаза–цГМФ), имеет эндотоксин и ферменты агрессии лецитиназу, каталазу, гиалуронидазу, ДНКазу, РНКазу, нейраминидазу.

Чувствительность к факторам внешней среды. Чувствительны к температуре 80-100⁰С, растворам хлорамина, фенола.

Подвид K. pneumoniae вызывает бронхопневмонию, абсцессы легких, реже менингит, конъюнктивиты, уретриты, сепсис, энтериты, артриты. Наибольшей тяжестью обладает генерализованное септикопиемическое течение заболевания, приводящее иногда к смертельному исходу (рис. 17).

Свойства: возбудители выделяют энтеротоксин, растут на средах с желчью и цитратом, разлагают углеводы (дульцит и лактозу до кислоты, а глюкозу до кислоты и газа), на бромтимоловой среде дают желтые колонии. Выделяют уреазу, лизиндекарбоксилазу, ацетоин. Проба Фогеса-Проскауэра положительная. Оксидаза- каталазаположительны. Микроскопия юных колоний дает петлеобразное расположение возбудителя. В чистой культуре имеют вид диплобактерий.

Дифференциация от остальных клебсиелл проводится по вышеуказанным свойствам, действию специфических сывороток в РА, реже – в реакции преципитации и по действию специфических бактериофагов.

Подвид K.ozaеnae вызывает хроническое инфекционное заболевание дыхательной системы, которое сопровождается атрофическим ринитом, образованием плотных корок в носовых ходах и может сопровождаться зловонным насморком, поражаются глотка, трахея, гортань.

Общие свойства как у всех клебсиелл, но при микроскопии колоний выявляют концентрическое расположение возбудителей, на бромтимоловой среде образуют желтые колонии; разлагают лактозу до кислоты, остальные ферментативные свойства непостоянные. Агглютинируются специфической сывороткой, лизируются специфическим бактериофагом.

K. rhinoscleromatis вызывает склерому – хроническое заболевание дыхательных путей человека, сопровождающееся образованием инфильтратов на слизистых носа, глотки, трахеи, которые постепенно превращаются в рубцы и затрудняют дыхание. Реже развиваются атрофические формы риносклеромы.

Свойства общие для всех клебсиелл, но не обладают ферментативной активностью, непостоянно могут разлагать только глюкозу, используют цитрат, имеют специфические АГ, при микроскопии юных колоний выявляются палочки, плотно расположенные по концентрическим окружностям. В организме могут располагаться внутриклеточно, образуя гигантские «клетки Микулича», в склеромной ткани много плазмоцитов.

Иммунитет непрочный, в основном носит клеточный характер, возможна ПЧЗТ.