Глава 4. Этиологическое воздействие лазерного излучения.

Нефроурологическая патология воспалительного генеза занимает одно из ведущих мест по частоте распространения среди взрослого населения.

Проблема лечения острых неспецифических заболеваний почек является одной из самых актуальных в современной урологии. Согласно мировым ста-тистическим данным ежегодно на Земном шаре острым пиелонефритом забо-левают около 1 % населения. Несмотря на большие достижения фармакологи-

ческой науки в разработке новых антибактериальных препаратов, которые яв-ляются основными в лечении данного заболевания, результаты лечения этой категории пациентов далеко не всегда удовлетворяют своими результатами клиницистов, так как иногда острый воспалительный процесс переходит в хро-нический, что приводит в последующем к развитию хронической почечной не-достаточности. Данный факт можно объяснить высокой вирулентностью и ре-зистентностью микроорганизмов, вызывающих острый пиелонефрит, к широко применяемым антибактериальным препаратам, снижением защитных сил ор-ганизма, а также изменением течения воспалительного процесса в ткани почки вследствие извращения иммунных реакций при антибактериальной терапии.

Следует особо отметить, что наиболее часто у больных острым пиелонеф-ритом в моче выделяется кишечная палочка (до 95%), как в виде монокуль-туры, так и в ассоциациях с другими микроорганизмами, что является одним из наиболее значимых этиологических агентов данного заболевания.

Способность прикрепляться (адгезия) к различным поверхностям широко распространена среди микроорганизмов. В бактериальной клетке функцию распознавания и прикрепления несут субстанции, названные адгезинами, клет-ки. Часто адгезины входят в состав органелл – фимбрий (рис. 7).

Рис. 7. Схематическое изображение Esherichia coli (кишечной палочки)

Адгезины у кишечной палочки выполняют роль медиатора в прикреплении микробной клетки к микроворсинкам эпителия , и поэтому часто рассматрива-ются как фактор колонизации. С помощью адгезинов осуществляется процесс узнавания кишечной палочкой соответствующей ткани, чувствительной к дей-ствию токсина, продуцируемого этим патогеном. Следовательно, на молеку-лярном уровне адгезины выполняют функцию распознавания мембранного ре-цептора эукариотической клетки, на клеточном – они обеспечивают микробу прикрепление к клеткам слизистой оболочки и на популяционном уровне - ко-лонизацию эпителиальной ткани.

Условиями, определяющими интенсивность процесса адгезии, следует считать: величину бактериального инокулята, степень вирулентности микроор-ганизма, тропность последних к разным тканям и органам хозяина, благодаря наличию на поверхности бактерий лигандов (адгезинов), «узнающих» клеточ-ные рецепторы, индивидуальную чувствительность эукариотических клеток, связанную с присутствием комплиментарных лигандам мембранных рецепто-ров (рис. 8.)

Рис. 8. Электромикрограмма адгезии E. coli к стенке

На процесс специфической адгезии микроорганизмов к слизистой оболоч-ке оказывают влияние многие факторы, в частности, секреторные иммуногло-булины, аналоги рецепторов мембран, лизоцим, различные ионы, химические вещества. Существует два способа увеличения адгезивной способности клеток

– это экспрессия новых рецепторов на поверхности клеток в ответ на стимули-рование и активация рецепторов, находящихся на клеточной поверхности.

Для оценки воздействия низкоинтенсивного лазерного излучения в ком-бинации с постоянным магнитным полем с использованием лазерно-терапевтического аппарата «РИКТА» были взяты 123 штамма кишечной па-лочки, выделенные у пациентов острым необструктивным пиелонефритом, на-ходившихся на лечении в урологическом отделении городской клинической больницы 29 города Москвы. Штаммы были идентифицированы на кафедре микробиологии медицинского факультета РУДН и депонированы во Всерос-сийском музее аэробных культур ГИСК им. Л.А. Тарасевича.

Микроскопическое исследование показало, что все штаммы кишечной па-лочки представляют собой грамотрицательные палочки. Однако оно выявило различия в размерах клеток от 1,1 – 1,5 до 2,0 –4,0 мкм (64 штамма) до 1,1 –1,5

– 2,0-4,0 мкм (59 штаммов), клетки встречались отдельно или в парах. Культурально-морфологическое изучение показало, что все штаммы при

инкубировании на МПА через 20-22 часа при температуре 37 образуют гладкие полупрозрачные слабовыпуклые колонии диаметром 1,5-2,5 мм.

Исследование биохимических свойств выделенных от больных штаммов кишечной палочки подтвердило, что все штаммы обладают типичными для дан-ного вида свойствами. Культуры штаммов обладали гемолитическими свойства-ми, относятся к ОК группе, и, следовательно, являются энтеропатогенными.

Для изучения влияния НИЛИ на уровень жизнеспособности было проведено исследование , которое заключалось в том, что взвесь бактерий в концентрации доведенной до 10 единиц ОЕ была обработана НИЛИ с частотой следования им-пульсов 1000 Гц в течение 1 и 10 минут и последующим 10-кратным титровани-ем в физиологическом растворе и рассевом на чашки Петри со средой Эндо.

Результаты исследования также показали отсутствие достоверного воздей-ствия НИЛИ на жизнеспособность штаммов кишечной палочки

Адгезивность штаммов изучали в системе in vitro на эритроцитах челове-ка В (Ш) (Rh положит.) по методике В. Брилиса.

Для оценки адгезивной способности кишечной палочки были выбраны эритроциты человека потому, что на их поверхности имеется гликофорин- ве-щество, идентичное гликокаликсу эпителиальных клеток, на котором располо-жены рецепторы для адгезинов микробов. В результате исследований выявле-но, что все штаммы кишечной палочки исходно имеют разный уровень адге-зивности.

Результаты исследований показали достоверное снижение адгезивной ак-тивности уропатогенных штаммов E. coli, выделенных у больных острым пие-лонефритом в среднем на 18 – 38 % (рис. 9).

Рис. 9. Влияние НИЛИ на адгезивную активность уропатогенных штаммов E.coli, выделенных у больных острым пиелонефритом.

Это, по нашему мнению, обусловлено непосредственным воздействием НИЛИ на сами адгезины. Неодинаковое снижение адгезии при различной экс-позиции связано с присутствием различных видов адгезинов, в частности - на

пили, которые ответственны за адгезивную способность кишечной палочки. Исследования показали, что 91% штаммов уропатогенной кишечной палочки, вызывающих острый пиелонефрит, обладают пилями. Тогда как штаммы ки-шечной палочки, вызывающей острый цистит и асимптоматическую бактериу-рию, обладают пилями только в 19 % и 14% случаев соответственно.

Таким образом, как свидетельствуют приведенные данные эксперимен-тальных исследований воздействия НИЛИ в импульсном режиме с частотой следования импульсов 1000 Гц снижает адгезивную способность кишечной палочки на 25-36%, что обусловлено воздействием лазерного излучения непо-средственно на адгезины бактерий. Именно это и доказывает этиопатогенетиче-ское воздействие лазерного излучения на основных возбудителей острого пие-лонефрита.