Обнаружение углеводного компонента в белках

Гликопротеиды – это сложные белки, простетическая группа которых представлена углеводами, а также их производными (гексозаминами, глюкуроновой кислотой, сиаловой кислотой и др.) они входят в состав ткани, слизей (муцин), клеточных мембран.

Простетитческая группа гликопротеидов представлена нейтральными и кислыми мукополисахаридами. К кислым мукополисахаридам относятся гиалуроновая, хондроитинсерная кислоты и гепарин. Гиалуроновая кислота входит в состав соединительной ткани, роговицы глаза, стекловидного тела, пупочного канатика, сердечных клапанов. Хондроитинсерная кислота содержится в хрящевой и соединительной тканях, гепарин – в лёгких и печени.

Почти все белки содержат в своём составе углеводные компоненты. Благодаря этому большинство белков в присутствии концентрированной серной кислоты дают характерное для углеводов фиолетовое окрашивание с α-нафтолом (реакция Молиша) или красное окрашивание с тимолом. Окраску с нафтолом или тимолом даютфурфурол и его производные, которые образуются из углеводов под действием концентрированной серной кислоты.

Опыт 5. Реактив Фелинга

В одну пробирку налейте 1 мл раствора глюкозы, а во вторую – 1 мл раствора сахарозы. В обе пробирки добавьте 0,5 мл реактива Фелинга. Содержимое пробирок нагрейте до начала кипения.

Опыт 6. Реактив Толленса (аммиачный раствор нитрата серебра)

В пробирку налейте 1 мл раствора глюкозы и добавьте 0,5 мл аммиачного раствора нитрата серебра. Содержимое пробирок нагрейте до начала кипения.

Опыт 7. Реакция на присутствие углеводных компонентов (реакция Молиша)

1. Наливают в 2 пробирки по 1-2 мл раствора сахара, добавляют в первую пробирку 5-6 капель раствора α-нафтола, а в другую пробирку - 5-6 капель раствора тимола.

2. Осторожно подслаивают в обе пробирки по 1-2 мл концентрированной серной кислоты. Наблюдают фиолетовое (в случае α-нафтола) и красное (в случае тимола) окрашивание на границе раздела серной кислоты и раствора сахара.

3. Проделывают те же реакции, взяв вместо раствора сахара раствор белка. Отмечают положительную реакцию на на наличие углеводных групп.

Опыт 8. Открытие углеводного компонента в яичном белке (гликопротеиды)

В сухую пробирку вносят 5 капель 1%-ного раствора яичного белка и проводят реакцию Молиша. К 10 каплям раствора яичного белка прибавляют 2-3 капли 1%-ного спиртового раствора тимола и по стенке пробирки (осторожно) – 20 капель концентрированной серной кислоты. При встряхивании на дне пробирки образуется красное окрашивание.