Паразитологическое исследование

Это последовательное вскрытие органов и тканей с целью обнаружения паразитов. Для исследования берется не менее 15 живых или только что уснувших рыб каждого вида и возраста и не менее 25-ти экземпляров личинок рыб.

Для обнаружения паразитов используют компрессионный способ, когда ткань или орган помещают между стеклами, сдавливают до прозрачности, а потом исследуют под микроскопом. Для определения интенсивности инвазии гельминтов и ракообразных учитывают в абсолютных величинах, а простейших – в 25-ти полях зрения микроскопа (7 х 10, 7 х 40 в зависимости от величины паразита).

Порядок проведения работы следующий:

1. Осмотр рыбы (крустацеозы, бделлозы, постодиплостомоз, филометроидоз). Соскоб скальпелем слизи с поверхности тела и исследование ее под микроскопом в капле воды или изотонического раствора натрия хлорида под покровным стеклом (простейшие).

2. Берут кровь из сердца или хвостовой артерии и готовят мазок, который фиксируют 5 минут в метиловом спирте и окрашивают по методу Романовского.

Сразу, после взятия крови, вскрывают полость сердца, выпускают кровь на стекло и под микроскопом исследуют на наличие сангвиникол.

3. Микроскопируют плавники (простейшие, моногенеи, рачки).

4. Исследуют жабры. Удаляют жаберные крышки, с двух сторон отсекают жаберные дуги и исследуют их на наличие крупных паразитов, затем делают соскоб и просматривают его под малым и большим увеличении. Скальпелем отделяют жаберные лепестки от дуг и компрессионным способом просматривают под микроскопом (простейшие, моногенеи, личинки трематод, цисты микроспоридий).

5. Проводят исследование глаз. Отделяют глазное яблоко, извлекают хрусталик. Компрессионным способом исследуют под микроскопом (диплостомоз, миксоспоридии).

6. Вскрывают полость тела, осматривают и извлекают внутренние органы: кишечник и, связанные с ним, органы (печень, желчный пузырь, селезенку), кишечник отсекают у ротовой полости и анального отверстия; гонады, плавательный пузырь, почки, мочевой пузырь. Отпрепарированные органы помещают в бактериологические чашки, следя за тем, чтобы они не соприкасались друг с другом и были постоянно влажными.

Осматривают брюшную полость (личинки цестод, нематод, трематод). Затем исследуют желчный и мочевой пузыри, их разрезают и изучают содержимое под микроскопом (амебоиды, миксоспоридии, трематоды, инфузории). Исследуют печень, селезенку, гонады, почки, жировую ткань. Небольшой кусочек от каждого органа исследуют под микроскопом под микроскопом на наличие спор миксоспоридий. Затем компрессионным способом под МБС (трематоды, цестоды, нематоды).

Кишечник разделяют на небольшие части и каждую разрезают вдоль, производя осмотр содержимого (микро- и макроосмотр). Затем под микроскопом исследуют соскоб со слизистой оболочки кишечника и компрессионно изучают кишечник (простейшие, трематоды, цестоды, нематоды).

Плавательный пузырь осматривают внешне, а затем делают соскоб и компрессионно исследуют под микроскопом.

Мускулатуру освобождают от кожи, делают через 0,5 мм поперечные разрезы, визуально осматривают, раздвигая их препаровальной иглой. Компрессионно исследуют 1 см мускулатуры, (цестоды, нематоды, трематоды).