МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ МОРФОЛОГИИ БАКТЕРИЙ. МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ.

Техника окраски по Граму(указать, в какие цвета окрашиваются бактерии на каждом этапе окрашивания по методу Грама/ раскрасить таблицу)

Этап окраски	Грамположительные бактерии	Грамотрицательные бактерии
1. Окрашивание генцианвиолетом (генциановым фиолетовым) (время экспозиции 1минута )
2. Обработка раствором Люголя (время экспозиции 1минута ))
3. Обработка 96% спиртом (время экспозиции 1минута )
4. Окрашивание водным фуксином или сафранином (время экспозиции 2 минуты ))

Основные морфологические группы бактерий(изобразите в виде цветных рисунков в соответствии с окраской по Граму):

КОККИ
Диплококки	Стрептококки	Стафилококки	Сарцины
ПАЛОЧКИ
Бактерии	Бациллы	Стрептобациллы	Клостридии
ИЗВИТЫЕ ФОРМЫ
Вибрионы	Спириллы	Спирохеты

1►Окраска по Граму мазков из бульонной культуры стафилококка, агаровой культуры кишечной палочки и их смеси. Зарисовка препаратов.

Смесь бактерий (Staphylococcus aureus, Escherichia coli) Окраска по Граму Увеличение x 630

2►Приготовление мазка из культуры дифтерийной палочки, окраска метиленовым синим по Леффлеру и по Нейссеру. Зарисовка препаратов.

Corynebacterium diphtheriae Окраска по Леффлеру Увеличение x 630

Corynebacterium diphtheriae Окраска по Нейссеру Увеличение x 630

3►Постановка и учет результатов КОН-теста с культурами золотистого стафилококка и кишечной палочки.

Результат КОН-теста (с 3% раствором) Staphylococcus aureus стенка не разрушается, Escherichia coli стенка разрушается образуются тянущиеся за петлей слизистые нити .

ДЕМОНСТРАЦИИ

C.diphtheriae	Bordetella	Escherichia coli	B. anthracis
окраска метиленовым синим по Леффлеру	окраска по Граму	окраска по Граму	окраска по Граму
Палочки неправильной формы, беспорядочно, «римские V и X»	Коккобактерии – слегка вытянутые палочки	Палочки с закругленными концами	Стрептобациллы, образующие в организме капсулу

(указать методы окраски микроскопических препаратов и особенности морфологии микроорганизмов – форму и расположение в препарате)

4►Приготовление мазка из агаровой культуры спороносных бацилл, окраска по Цилю-Нельсену (или по методу Ожешко), микроскопия и зарисовка.

Техника окраски по Цилю-Нельсену(указать, в какие цвета окрашиваются бактерии на каждом этапе окрашивания/ раскрасить таблицу)

Этап окраски	Окраска спор по Ожешко На нефиксированный мазок наносят 0,5% р-р HСl и подогревают 1-2 минуты над рламенем, промывают водой, фиксируют и далее см. ниже	Окраска кислото-устойчивых бактерий
1. Обработка на мазок наносят фильтровальную бумагу наливают карболовый фуксин Циля и нагревают над пламенем спиртовки до отхождения паров (время экспозиции до отхождения паров ) Также необходимо снять бумажку, остудить препарат, сполоснуть водой
2 !. Обработка 5% раствором H2SO4 Концентрация 5%
3. Окрашивание водным раствором метиленового синего (время экспозиции) 3-5 минут

* МТ – Mycobacterium tuberculosis; Str – стрептококк.

5►Микроскопия препаратов микроорганизмов, окрашенных по Цилю-Нельсену. Зарисовка препаратов.

Bacillus anthracoides Окраска по Цилю-Нельсену. Увеличение x 630

Mycobacterium tuberculosis в мокроте Окраска по Цилю-Нельсену. Увеличение x 630

6►Приготовление мазка из агаровой культуры палочки риносклеромы, окраска по Бурри-Гинсу, микроскопия и зарисовка.

Klebsiella rhinoscleromatis Окраска по по Бурри-Гинсу Увеличение x 630

7►Приготовление препарата «раздавленная капля» или «висячая капля» из сенного настоя для изучения подвижности (указать особенности микроскопии препарата)

1 этап

2 этап

3 этап

1) Нанесение взвеси микроорганизмов на покровное стекло;

2) Смазывание краев лунки на предметном стекле вазелином и помещение покровного стекла на предметное стекло; 3)Готовый препарат, микроскопируют с иммерсионным обьективом

Бакте́рии (др.-греч. βακτήριον — палочка) — группа (царство) прокариотных (безъядерных) микроорганизмов, чаще всего одноклеточных. К настоящему времени описано около десяти тысяч видов бактерий и предполагается, что их существует свыше миллиона, однако само применение понятия вида к бактериям сопряжено с рядом трудностей.

Спириллыотличаются спиральным (штопор) строением клетки и биполярным расположением жгутиков; энергию они получают за счет дыхания. Выделяют несколько родов спирилл. S. volutans - гигантская спирилла, которую всегда можно найти в свиной навозной жиже; она получила известность благодаря открытию «волютина» (полифосфатов); в чистой культуре растет только при пониженной концентрации 02 (примерно 5%), ее следует поэтому считать микроаэротолерантнои. Spirillum minus –возбудитель Содоку – болезни укуса крыс.

Метод Нейссера используется для выявления зерен волютина. Мазок окрашивается уксуснокислым метиленовым синим 2-3 минуты, при этом происходит химическое взаимодействие красителя и волютина. Зерна волютина окрашиваются в черный цвет. При промывке водой тело клетки обесцвечивается и затем в течение 1 мин докрашивается везувином в желто-коричневый цвет.