Окраска по Нейссеру
Назначение: для выявления зерен волютина у возбудителей дифтерии (С. diphtheria), у них зерна волютинараспалагаются на концах палочек .ЭТАПЫ:
1) фиксированный мазок окрашивают ацетатом синьки Нейссера( основная окраска) в течение 2-3 мин.
2) наносят раствора Люголя (протрава) на 10-30 секунд;
3) промывают препарат водой;
4)окрашивают везувином (дополнительная окраска) в теч. 0,5-1 мин.
5) промывают препарат водой, высушить и микроскопируют.
МЕХАНИЗМ: Зерна волютина представляют собой соединения, имеющие в отличие от цитоплазмы щелочную реакцию, и поэтому избирательно воспринимают ацетат синьки, окрашиваясь в темно-синий цвет. Цитоплазма клетки, обладающая кислой реакцией, воспринимает щелочной краситель везувин и окрашивается в желтый цвет
15. Актиномицеты. Таксономия. Особенности строения. Общие признаки с бактериями и грибами. Патогенные представители, вызываемые заболевания.
Таксономия. Царство :прокариоты Отдел: скотобактерии Класс: бактерии Порядок: Actinomycetales Семейство: Actinomycetaceae Род: Actinomyces и Nocardia. Вид: A.bovis, A.israili возбудители актиномикоза и нокардиоза Nocardia asteroides, Nocardia brasitiensis-патогенные | Особенности строения:Грамм+ бактерии. -Нет капсулы, жгутиков, ворсинок. Есть включения. -Имеют вид длинных и ветвящихся несептированных нитей (длина до 600 мкм, толщина до 2 мкм). - Встречаются тонкие, прямые или слегка изогнутые палочки или кокковидные формы, они образуются при фрагментации мицелия. -В составе пептидогликана КС обнаружены сахара (галактоза, арабиноза, ксилоза), миколовые кислоты и много жирных кислот. -Размножаются спорами, поперечным делением, почкованием. Споры не обладают термоустойчивостью, но выдерживают высушивание. -Являются представителями нормальной микрофлоры организма человека. -Продуцируют антибиотики. |
Актиномицеты — бактерии, так как: · Состоят из одной клетки · Грамм+, полиморфны · имеют нуклеоид, а не истинное ядро. · содержат в клеточной стенке пептидогликан, а не хитин и целлюлозу, которые имеют грибы; · чувствительны к бактериофагам и АБ, а не к противогрибковым препаратам; · хорошо растут в слабо щелочной среде, а грибы — в кислой. | Общие признаки с грибами: форма ветвящейся нити-гифы, которые, переплетаясь, как и плесневые грибы, образуют видимый глазом мицелий: Субстратный мицелийформируется в результате врастания клеток в питательную среду. воздушный мицелийобразуется на поверхности среды. На концах воздушного мицелия актиномицеты образуют спороносцы. Размножаются как путем фрагментации мицелия, так и путем образования экзоспор (стрептомицеты) на воздушном мицелии. |
Представители актиномицетов и их роль в патологии.Для человека патогенны очень немногие виды актиномицетов ― возбудители актиномикоза и нокардиоза.
Представители рода Actinomyces — свободноживущие микроорганизмы, обитают в почве богатой перегноем, на растениях, в воде. Некоторые присутствуют в ротовой полости, зубном налете, лакунах миндалин, в слюнных железах, на слизистой оболочке ЖКТ, обнаруживаются в камнях желчевыводящих и мочевых путей.
Актиномикоз (во всех странах )-это первично-хроническая антропо-зоонозная инфекция с длительным прогрессирующим течением и возможностью рецидивов. A. Israeli -эндогенное развитие заболевания в результате перехода актиномицетов из сапрофитического состояния в паразитическое при ИДС, воспалительных заболеваниях слизистых полости рта, респираторного тракта и ЖКТ.
Возможно такжеэкзогенноеинфицирование при заносе воз-ля из окружающей среды в ротовую полость.
Инкубационный период– до нескольких лет.В месте внедрения инфекции развивается воспалительный очаг и образуетсягранулема—очень плотный и почти безболезненный инфильтрат, состоящий из макрофагов и актиномицетов. Гранулема прорастает в окружающие ткани, в результате чего в процесс вовлекается кожа: она становится цианотично-багровой. Когда гранулема нагнаивается, ее центр подвергается некротическому распаду, а при вскрытии абсцесса вначале появляется флюктуация, затем образуются длительно незаживающие свищи. Из свищей выделяется гной, в к-м содержатсядрузы — белые или желтые гранулы, диаметром до 2 мм. Затем происходит фиброз (рубцевание) гранулемы. В образовании нагноений играет роль вторичная, преимущественно стафилококковая, инфекция.
Для диагностики используют бактериоскопический, бактериологический, серологический и аллергологический методы. Обычно диагноз ставят бактериоскопически по обнаружению в нативном исследуемом материале друз актиномицетов, имеющих вид мелких желтоватых или серовато-белых зернышек с зеленоватым отливом. Видны сплетения тонких гиф с пигментироваными зернами, по периферии от этого клубка мицелия отходят радиально в виде лучей гифы с колбовидными утолщениями на концах. По Граму споры окрашиваются в темно-фиолетовый, мицелий — в фиолетовый, а друзы — в розовый цвет. По Цилю—Нельсону мицелий окрашивается в синий, а споры — в красный цвет.
Окончательный диагноз устанавливают на основании выделения возбудителя. Для подавления роста сопутствующей микрофлоры гной и мокроту перед посевом центрифугируют в растворе пенициллина и стрептомицина, затем отмывают изотоническим раствором NaCJ для удаления антибиотиков. Засевают на питательные среды (сахарный агар, среда Сабуро и др.) и культивируют в аэробных и анаэробных условиях. Выделяют и идентифицируют чистую культуру по общепринятой схеме.
У выделенных культур определяют способность сворачивать и пептонизировать молоко. Выделение анаэробных видов подтверждает диагноз актиномикоза.
Для серодиагностики ставят PCК с актинолизатом. НО положительные результаты могут отмечаться при раке легкого и тяжелых нагноительных процессах. Применение в качестве АГ вместо актинолизата внеклеточных белков актиномицетов повышает чувствительность РСК. Этот же АГ можно использовать и для постановки РНГА. Аллергическую пробу проводят с актинолизатом. Диагностическое значение имеют лишь положительные и резко-положительные пробы. При висцеральном актиномикозе алтергическая проба часто отрицательная.
Лечение – применение пенициллина, тетрациклина, эритромицина, клиндамицина. Специфическая профилактика не разработана. Неспецифическая профилактика – направлена на повышение иммунного статуса, важно соблюдать гигиену полости рта, своевременно лечить зубы, воспалительные заболевания миндалин и слизистых оболочек.
Нокардиозы— оппортунистические инфекции человека, вызываемые нокардиями (Nocardia asteroides, Nocardia brasitiensis)., которые характеризуются преимущественным поражением легких и подкожной клетчатки с развитием гнойно-гранулематозного воспаления.
Патогенез. Возбудитель захватывается альвеолярными макрофагами, в цитоплазме которых он сохраняет жизнеспособность, блокируя слияние фагосомы с лизосомами и ингибируя синтез лизосомальных ферментов. Персистенция возбудителя ведет к развитию воспаления с формированием множественных сливных абсцессов и гранулем.(ЛЕГОЧНАЯ ФОРМА) Воспаление органов средостения, мягких тканей грудной клетки и др.
Инфекции ПОДКОЖНОЙ клетчатки развиваются при попадании в рану возбудителя и характеризуются развитием гнойного воспаления неглубоких пустул в месте проникновения возбудителя. У иммунодефицитных лиц возможно развитие диссеминированных инфекций.
Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования служат мокрота, гной, биоптаты тканей. Для диагностики используют бактериоскопический и бактериологический методы. Обычно диагноз ставят бактериоскопически по обнаружению в исследуемом материале несептированных гиф. Окончательный диагноз устанавливают на основании выделения возбудителя.
Лечение -применять сульфаниламиды или их комбинации с гентамииином или левомицетином. Специфическая профилактика не разработана. Неспецифическая профилактика направлена на повышение иммунного статуса
16. Спирохеты. Таксономия. Особенности строения. Общие признаки с бактериями и простейшими. Патогенные представители. Вызываемые заболевания.
Царство :прокариоты Отдел: скотобактерии Класс: бактерии Порядок: Spirochaetales Семейство: Spirochaetaceae, Leptospiraceae -Род: Treponema Вид: T. pallidum-сифилиса, T. carateum, T. denticola, T. minutum, T. vincentii, T. scoliodontum, T. refringens -Род: Borrelia Вид: B. recurrentis-возвратоноготифа, B. burgdorferi, B. persica, B. hispanica, B. duttoni -Род: Leptospira Вид: L. interrogans-лептоспироза, L. biflexa | Спирохеты: - Грам- извитые, тонкие, обладающие активной подвижностью микроорганизмы толщиной — до 0,6 мкм, длиной до 500 мкм. -Не образуют спор, нет капсулы. -Снаружи от ЦПМ находится тонкая и эластичная КС, состоящая из пептидогликанового слоя (мало) и наружной мембраны, между которыми расположены осевые фибриллы, в совокупности называемые аксиальные нити-состоят из белка флагеллина. Ак.нити - винтообразной формы м/о придавая клеткам вращательное, сгибательное и поступательное движение. -Есть жгутики |
Спирохеты состоят из цитоплазматического цилиндра (спирально закручен вокруг пучка осевых фибрилл), покрытого ЦПМ. Фибриллы отходят от субтерминальных прикрепительных дисков, расположенных на концах клетки. Один конец фибрилл прикреплен к субтерминальному прикрепительному диску — блефаропласту, а другой конец фибрилл свободен, поэтому фибриллы направлены навстречу друг другу. При движении спирохеты образуют петли, изгибы, которые называются вторичными завитками.Истинные жгутики крепятся в ЦПМ и отходят от нее радиально, а осевые фибриллы располагаются вдоль протоплазматического цилиндра и заключены во внешнюю оболочку (наружную мембрану).
Спирохеты в жидких средах совершают движения трех типов: быстрое вращательное вокруг длинной продольной оси, сгибательное и поступательное (штопорообразное, винтообразное). Они также способны скользить по твердому субстрату.Спирохеты отличаются друг от друга размерами клеток, количеством и характером завитков, числом фибрилл.
Общие признаки с простейшими: · образуют цисты – при неблагоприятных условиях · отсутствует клеточная стенка · есть аксиальная нить, двигаются за счет ее сокращения – несколько типов движений · особое строение тела (множество волокон, фиксированных на полюсах) · вызывают заболевания приступообразного характера · Отличаются по количеству и амплитуде завитков. · Живут и в окружающей среде и в организме | Признаки бактерий (по морфологичким и тинкториальным) · Прокариоты грамм- · Спиралевидная форма · Размножаются путем деления |
Общие признаки спирохетозов:
– генерализованный характер;
– спирохетемия;
– рецидивирующее течение, обусловленное изменением антигенной структуры либо образованием покоящихся форм (L–форм, цист);
– экзантема (сыпь на коже);
– чувствительность спирохет к бензилпенициллину.
Представители спирохет и их роль в патологии:3 Рода: Treponema, Borrelia, Leptospira.
1) Трепонемы(род Treponema) - извитые бактерии, имеющие 8-12 мелких завитков и 3-4 фибриллы. У Вызывают сифилис (Т. pallidum) и фрамбезию (Т.pertenue).
Сифилис— антропоноз, передается разными путями: половым, котактно-бытовым (через белье, посуду, зубные щетки, бритвенные приборы, сигареты, помаду, соски, молоко кормящей матери) через поврежденные кожу и слизистые, трансплацентарным(врожденный ранний и врожденный поздний сифилис) и трансфузионным («обезглавленный сифилис», начинается со второй стадии: появления сыпи и симптомов интоксикации через 2–3 месяца после гемотрансфузии инфицированной крови).
T. pallidum неустойчива во внешней среде: погибает при высыхании биологического материала, содержащего возбудителя, мгновенно — при 1000С; чувствительна к тяжелым металлам и дезинфектантам. Однако в донорской крови сохраняет инфекционную активность в течении суток, во влажной среде и тканях трупа — в течение 3 суток.В третичном периоде сифилиса возбудитель поражает нервную систему, поэтому препараты, используемые для лечения сифилиса должны проникать через ГЭБ.
При действии неблагоприятных факторов (обычно неправильный подбор дозы АБ) возбудитель сифилиса может образовывать покоящиеся формы: L–формы (формы с дефектами КС) или цисты (локализованные в стенке сосудов, свернутые в шар спирохеты, покрытые непроницаемой муциновой оболочкой) и в таком состоянии длительно персистировать (переживать) в организме. Клинически образование покоящихся форм ассоциируется с ремиссией- только обнаружение АТ, иногда ошибочно принимаемой за реконвалесценцию, прекращение приема антимикробных препаратов в таком случае ведет к эксцистированию трепонем и к рецидиву заболевания- с выявлением АГ.
2) Боррелии(род Borrelia) - это длинные извитые бактерии, имеющие 3-8 крупных завитков и 7-20 фибрилл. Возбудители болезни Лайма - B. burgdorferiи возвратного тифа-B. Recurrentis, а также возбудители эндемических клещевых борелиозов (В. duttonii, В. persica, В. hispanica, В. latyschewii, В. caucasica)
B. Recurrentis проникают в организм только через поврежденные кожу и слизистые. Распространяютсятрансмиссивным путем.Короткий инкубационный период (неделя).Эпидемический вшивый возвратный тиф — антропоноз. Bозбудитель распространяется платяной и головной вшами, при раздавливании вшей и втирании содержащей боррелий гемолимфы, при расчесывании укуса. Боррелии с кровью заносятся в желудок, и оттуда в полость тела (гемолимфу), где размножаются в вшах.
Для боррелий характерна высокая антигенная изменчивость:каждое новое поколение отличается структурой поверхностных АГ, что обусловливает волнообразный характер лихорадки при возвратном тифе. Первый лихорадочный приступ заканчивается образованием АТ против боррелий первой генерации. Под влиянием этих АТ большая часть борелий погибает, клинически наступает ремиссия. Часть боррелий изменяет АГ-е свойства и наступает новый приступ лихорадки. Всего наблюдается 7–8 лихорадочных волн. Выздоровление наступает, когда в крови появляется спектр антител, лизирующих все варианты боррелий. Эта особенность дала название заболеванию – возвратный тиф.
Эндемический среднеазиатский клещевой возвратный тиф — трансмиссивный зооноз. (Кавказ, Средняя Азия).Возбудителями являются многие виды боррелий.Резервуаром боррелий в природных очагах являются животные: разные виды грызунов (крысы, полевки, песчанки, ежи, барсуки), а также шакалы. Переносчиком являются паразитирующие на животных аргазовые клещи рода Ornithodorus, выделяющие возбудителя со слюной и испражнениями в течение всей их жизни. В природных очагах происходит постоянная циркуляция возбудителя от грызунов к клещам и обратно.
Человек заражается при укусах клеща или попадании испражнений клеща на поврежденную кожу. На месте инокуляции возбудителя образуется папула (первичный аффект). Заболевания чаще возникают в теплое время года во время активизации жизнедеятельности клещей. Население эндемичных по клещевому возвратному тифу районов приобретает невосприимчивость к циркулирующим возбудителям в результате бытовой иммунизации. В сыворотке крови местных жителей обнаруживаются антитела к боррелиям, распространенным в этом регионе.
Боррелиоз Лайма— клещевой боррелиоз лесов умеренного климатического пояса, занимает одно из первых мест среди природно-очаговых инфекций (весна-лето). Естественные хозяева B. burgdorferi — позвоночные животные, чаще грызуны, переносчики — иксодовые клещи. У клещей возбудитель локализуется в кишечнике, в полости тела, слюнных железах и гонадах и может передаваться трансовариально.
В организм человека B. burgdorferi попадаетсо слюной клеща при укусе. На месте укуса образуется пятно — двухцветная кольцевидная эритема с темно окрашенным периферическим контуром, оно увел-ся («ползучая эритема») . При отсутствии своевременного лечения развиваются хронические формы с многосистемными поражениями: часто поражаются кожные покровы, суставы (артриты) и нервная система (могут развиваться параличи с летальным исходом).
3)Лептоспиры «водная лихорадка»(род Leptospira) - это извитые бактерии (5-8 мелких завитков), как закрученная веревка. Они имеют 2 осевые фибриллы. Концы клеток изогнуты крючком и имеют утолщения. Лептоспиры образуют вторичные завитки, в результате чего приобретают S- образную форму. Патогенным представителем лептоспир является L. interrogans. попадают в организм с водой или пищей, что сопровождается кровоизлияниями ижелтухой.
Лептоспироз- острое природно-очаговое зоонозное заболевание. Больной человек выделяет возбудителя, но эпидемического значения не имеет. Резервуаром являются животные (млекопитающие, земноводные, пресмыкающиеся и птицы), которые переносят заболевание в бессимптомной форме и длительное время с мочой выделяют лептоспиры. Чаще это грызуны, КРС, свиньи, собаки. Попав в воду, почву, лептоспиры сохраняют жизнеспособность в течение 2–3 нед. В пищевых продуктах (молоко, масло, хлеб) выживают несколько дней.
Заражение человека в природных очагах происходит главным образом алиментарным путем (через контаминированные воду или пищевые продукты), а также контактно-бытовым (при купании в контаминированных водоемах, уходе за инфицированными животными, контакте с растительностью).
Лептоспиры обладают высокой инвазивной способностью, они могут проникать через неповрежденную кожу и слизистые оболочки ротовой полости, носа, глаза, ЖКТ. На месте внедрения возбудителя первичного аффекта не возникает. Затем лептоспиры проникают в кровь и разносятся в различные ткани и органы. Там происходит их размножение и поражение мышц, особенно икроножных, почек, печени, нервной системы. Различают тяжелые желтушные формы лептоспироза, ассоциированные с гепатитом и гломерулонефритом (болезнь Васильева-Вейля) и субклинические безжелтушные формы. Тяжесть заболевания зависти от реактивности макроорганизма. После перенесенного заболевания развивается длительная невосприимчивость к данному серовару лептоспир. Однако иммунитет типоспецифический, поэтому возможно повторное заражение другим сероваром лептоспир.
17. Особенности строения риккетсий. Общие признаки с бактериями и вирусами, патогенные представители. Вызываемые заболевания.
Царство :прокариоты Отдел: скотобактерии Класс: Риккетсии Порядок: Rickettsiales Семейство: Rickettsiaceae, Ehrlichiaceae Род: Rickettsia, Orientia, Bartonella. Вид:- группа сыпного тифа (R. Typhi, R. prowazekii -эпидемический сыпной тиф,) - группа клещевых риккетсиозов (R. conorii, R. akari, R. sibirica -клещевой риккетсиоз, R. rickettsii -пятнистую лихорадку Скалистых гор, R. australis, R. japonica, R. honei) Bartonella quintana ― возбудитель волынской лихорадки, Сoxiella burnetii ― возбудитель Q-лихорадки. | Риккетсии: · Грам- палочковидные мелкие до 4мкм бактерии. · Нуклеопротеиды при окраске по Романовскому-Гимзе представлены зернами (от 1 до 4) при этом риккетсии -красные, а инфицированные клетки – синие. · Риккетсии обладают независимым от клетки-хозяина метаболизмом, но они получают от него макроэргические соединения для размножения. · Нет капсулы, жгутиков, спор · могут иметь включения. · Обладают полиморфизмом: ü кокковидные однозернистые и палочковидные двухзернистые - при интенсивном размножении риккетсий в клетках; ü удлиненные палочки трех-четырехзернистые - при медленном размножении риккетсий; ü нитевидные многозернистые— на начальных стадиях и в фазу замедленного роста. · Размножаются простым делением, дроблением,образуя микрокапсулу. · Обитают в организме членистоногих (вши, блохи, клещи), которые являются для них хозяевами или переносчиками. Могут передаваться трансовариально. | |||
Общие признаки с вирусами: · Высокое содержание липидов и низкое – углеводов · Облигатные (абсолютные) внутриклеточные паразиты · невозможность культивирования на искусственных питат-х средахМОЖНО: в желточном мешке куриного эмбриона, в культурах клеток млекопитающих (там некоторые виды риккетсий образуют включения), реже — в организме лабораторных животных (морских свинок, белых мышей). | Общие признаки с бактериями: · Строение клеточной стенки · Наличие ДНК и РНК · Размножение бинарным делением (удваиваются только через 8-12 часов) внутри клеток хозяина | |||
Риккетсии чувствительны к действию неблагоприятных физических или химических факторов, некоторых АБ. Однако в высохших фекалиях вшей риккетсии могут сохранять инфекционность 3 месяца.
1) являются облигатными внутриклеточными паразитами, что связано с особенностями энергетического обмена: они не способны синтезировать НАД («энергетические паразиты» клеток-эукариотов). Паразитируют в ретикулоэндотелиальных клетках, клетках эндотелия сосудов. Место размножения (в цитоплазме и/или ядре клеток) является видовым признаком риккетсий.
2) жизненный цикл риккетсий складывается из двух стадий: вегетативной и покоящейся (малые формы, элементарные тельца). Вегетативные формы риккетсий активно размножаются путем бинарного деления. В покоящейся стадии риккетсии имеют меньшие размеры и дополнительную оболочку.
3) ЦПМ риккетсий отличается высокой проницаемостью, что является результатом их приспособления к паразитическому образу жизни.
Дата добавления: 2022-02-05; просмотров: 453;