Медицинская микробиология. Предмет, методы, задачи.

Медицинская микробиология(от греч. micros - малый, bios - жизнь, logos - учение) - наука, изучающая возбудителей инфекционных заболеваний человека и представителей собственной микрофлоры организма (морфологию, физиологию, экологию, биологические и экологические свойства, взаимоотношения с другими формами жизни), разрабатывает методы их культивирования и идентификации, диагностики, профилактики и лечения.

Предметом изучения медицинской микробиологии являются патогенные (болезнетворные) и условно-патогенные (в том числе и нормальная микрофлора организма человека) микробы.

Задачи:
1) Выявить возбудителей инфекционных болезней
2) Установить этиологическую роль м/о в норме и при патологии
3) Контроль за чувствительностью м/о к антибиотикам и др.препаратам
4) Разработка методов диагностики, специфической профилактики(вакцины), лечения(леч.сыворотки) инфекционных заболеваний
5) Микробиологический контроль окр. среды, продуктов питания, соблюдения режимов стерилизации, надзор за источниками инфекции в мед-х учреждениях.

Методы направлены на изучение свойств микробов, обусловливающих их патогенное действие, и процессы, которые возникают под их влиянием в организме человека и животных.
К основным методам микробиологии относятся:

1. микроскопический- изучение морфологических и тинкториальных признаков м/о с использованием специальной микроскопической техники (световая иммерсионная, темнопольная, фазово-контрастная, люминесцентная, электронная) ВИДИМ: форму, вид, расположение.

2. Метод культивирования м/о–выделение чистой культуры микробов и изучение их биологических свойств, позволяющие провести идентификацию.
-бактериологический
-вирусологический

3. серологический–применение иммунологических реакций для идентификации м/о по антигенной структуре, выявление антител к возбудителям в биологических жидкостях организма больного (чаще в сыворотке крови; от лат. serum - сыворотка); ИФА, РИФ, РИА

4. аллергологический–метод изучения инфекционно аллергии ГЗТ (клеточного иммунитета) –хр.паразит.-х инф-х. Оценка аллергических феноменов, возникающих в организме человека (на коже, слизистых оболочках или в крови) под действием компонентов или цельных клеток микроба-возбудителя;Не применяется в вирусологии

5. биологический - моделирование инфекционных процессов на лабораторных животных или куриных эмбрионах;

6. молекулярно-генетический–идентификация м/о по генетической структуре-изучение состава микробных нуклеиновых кислот с помощью ПЦР- полимеразной цепной реакции.

7. Экспресс методы диагностики –для установления наличия возбудителя в исследуемом материале (сыворотка крови, моча, слюна, с/м жидкость, мокрота) без выделения чистой культуры
-меченые серологические реакции- ИФА, РИФ, РИА-для выявления антигена возбудителя в биол.материале
-ПЦР-выявление фрагментов нуклеиновых кислот: РНК и ДНК

1. Начальный период развития микробиологии (А. Левенгук и др.)

Историю развития микробиологии можно разделить на пять этапов:

1. Эвристический - до изобретения микроскопов, связан с логическими и методическими приемами. (Гиппократ, Варрон и др.- предположения о природе заразных болезней) Фракасторо был одним из основоположников науки о причинах, условиях и механизмах формирования инфекционных заболеваний и способах их профилактики.

2. Морфологический–Левенгук (голлад-й) сконструировал«микроскоп», позволивший увеличивать рассматриваемые предметы в 300 раз, увидел «анималькулюсы». - в 1675 г. впервые описал простейших, в 1683г. ― основные формы бактерий: кокки, палочковидные и извитые. Он повсюду обнаруживал этих маленьких «зверушек»: в дождевой воде, испражнениях, зубном налете - и пришел к выводу, что окружающий мир густо заселен микробами. Однако тогда это был как интересный факт, который не имеет существенного практического значения.

3. Физиологический
Л. Пастер открыл:
1) природу брожения-вызывают м/о;
2) анаэробиоз;
3) опроверг теорию самозарождения-стерильный бульон в колбе с изогнутой S-образной трубкой не прорастают м/о;
4) обосновал принцип стерилизации- заложил основы дезинфекции, асептики и антисептики ;
5) разработал принцип вакцинации и способы получения вакцин

Роберт Кох (1843—1910) предложил окраску бактерий, микрофотосъемку, способ получения чистых культур, а также знаменитую триаду, получившую название триада Генле—Коха:
1) чтобы микроб обнаруживался только у больного и не обнаруживался у здоровых людей и бальных другими болезнями;
2) должна быть получена чистая культура микроба;
3) микроб должен вызвать аналогичное заболевание при заражении животных.
НО иногда трудно воспроизвести болезнь у животных, так как нет модели (например, ВИЧ-инфекция); нередко возбудитель обнаруживается у здоровых лиц (носительство).

4. Им­мунологический- был создан ряд теорий иммунитета: гуморальная теория П. Эрлиха, фагоцитарная теория И. И. Мечникова- учение о невосприимчивости (иммунитете), разработав теорию фагоцитоза и обосновав клеточную теорию иммунитета, теория идиотипических взаимодействий Н. Ерне, гипофизарно-гипоталамо-адреналовая теория регуляции иммунитета П. Ф. Здродовского и др.
- Р. Кох открыл такую форму реагирования иммунной системы, как ГЗТ; Ш. Рише, Ж. Портье, Г. П. Сахаров описали ГНТ; обе эти формы реагирования легли в основу учения об аллергии (К. Пирке, 1906).
- открыта толерантность к антигенам (П. Медовар, М. Гашек), а также иммунологическая память (Ф. Бернет и др.).
-изучение лимфоцитов, их роли в иммунитете, кооперативным взаимоотношениям между Т- и В-лф и фагоцитирующими клетками, киллерная функция лимфоцитов и т. д.
-изучена структура иммуноглобулинов (Р Портер и Д. Эдельман), открыты интерферон (А. Айзекс и Ж. Линдеман), интерлейкины (ИЛ) и другие иммуномодуляторы.

Иммунология в середине XX в. оформилась как самостоятельная наука, имеющая свои цели и задачи в области медицины, свою структуру и классификацию

5. Молекулярно-генетический - Достижения обеспечили успехи в борьбе с инфекционными болезнями и открыли новые пути и методы диагностики и терапии неинфекционных болезней, связанных с нарушениями в иммунной системе.Так как:
-была расшифрована молекулярная структура многих бактерий и вирусов, строение и состав их генома, структура АГ и АТ, факторов патогенности бактерий и вирусов, а также факторов иммунной защиты (комплемент, интерферон, иммуномодуляторы и др.).
-Генная инженерия позволила получать вакцинные (живые, синтетические, генно-инженерные)(против геп. В, ВИЧ-инфекции) и диагностические препараты на основе моноклональных АТ
-Открыты и используются иммуномодуляторы эндогенного и экзогенного происхождения для коррекции иммунного статуса.
-Разрабатывается иммуногенетика, целью которой является генопрофилактика и генотерапия иммунодефицитов. Генодиагностика – ПЦР
-Изучены системы гистосовместимости (НLA-системы), трансплантологии при решении проблемы преодоления иммунологической несовместимости при пересадках органов и тканей, а также в проблеме несовместимости матери и плода в акушерстве и гинекологии.
- Созданобольшое количество противовирусных и антибактериальных препаратов.

2. Работы Л. Пастера и Р. Коха. Их значение в становлении и развитии микробиологии.

Луи Пастер сделал ряд открытий во многих областях науки, что позволило ему стать основоположником : микробиологии, биотехнологии, дезинфектологии, стереохимии. Он открыл:
1) природу брожения(молочнокислое, спиртовое, уксусное) — это биологическое явление, которое вызывается микробами, их ферментами.
2) анаэробиоз;а группа микробов получила название анаэробов.
3) опроверг бытовавшую в его времена теорию самозарождения;Он доказал, что если стерильный бульон оставить в открытой колбе, то он прорастет, но если стерильный бульон поместить в колбу, которая сообщается с воздухом через спиралью изогнутую стеклянную трубку, то бульон не прорастет, так как бактерии с частицами пыли из воздуха будут осаждаться на изогнутых частях спиральной трубки и не попадут в бульон.
4) обосновал принцип стерилизации;Пастеризация-это прогревание при 120-140°С с целью уничтожения бактерий, которая послужила основанием для разработки принципов асептики и дезинфекции.
5) разработал принцип вакцинации и способы получения вакцин против куриной холеры, сибирской язвы и бешенства-антирабическая, он делает очень важный вывод, что ослабленные (аттенуированные) микробы, введенные в организм, создают в нем иммунитет против последующих заражений вирулентными микробами.
6) Он доказал, что при выращивании грибов усваиваются лишь определенные стереоизомеры.

Роберт Кох (1843—1910) предложил окраску бактерий-анилиновые красители, микрофотосъемку, способ получения чистых культур, а также знаменитую триаду, получившую название триада Генле—Коха:для доказательства роли микроба в возникновении специфической болезни необходимо три условия:
1) чтобы микроб обнаруживался только у больного и не обнаруживался у здоровых людей и бальных другими болезнями;
2) должна быть получена чистая культура микроба;
3) микроб должен вызвать аналогичное заболевание при заражении животных.
Но в наше время иногда трудно воспроизвести болезнь у животных, так как нет модели (например, ВИЧ-инфекция); нередко возбудитель обнаруживается у здоровых лиц (носительство).
Р.Коху удалось культивировать и описать возбудителя сибирской язвы, стафилококка, возбудителей раневых инфекций и столбняка, возбудителя туберкулеза (палочка Коха) и туберкулина, который нашел применение в диагностике этой инфекции, холерного вибриона и пути его передачи, открыл возбудителей возвратного тифа, трипаносомоза и других инфекций.

4. Основные принципы систематики бактерий. Таксономические категории. Критерии вида.
В основу таксономии микроорганизмов положены их генетическое родство, морфологические, физиологические, биохимические, антигенные и молекулярно-биологические свойства

Вид — это совокупность особей, объединенных по близким свойствам, но отличающихся от других представителей рода.
Подвид – разновидность внутри одного вида, они отличаются по физиологическим (biovar), морфологическим (morphovar) или по антигенным (serovar) свойствам.
Чистая культура – это совокупность однородных микроорганизмов, выделенных на питательной среде, характеризующихся сходными морфологическими, тинкториальными (отношение к красителям), культуральными, биохимическими и антигенными свойствами

В микробиологии существуют также более мелкие таксономические единицы, чем вид:
Штамм- это чистая культура микроорганизмов, выделенных из определенного источника и отличающихся от других представителей вида. Разные штаммы одного и того же вида бактерий могут отличаться друг от друга по целому ряду свойств, например, по чувствительности к антибиотикам, способности к синтезу токсинов, ферментов и др
Клон –это совокупность потомков, выращенных из единственной клетки м/о – чистая культура.

Критерии вида:

а) морфологический -световая и иммерсионная микроскопия (установить род и семейство);
б) тинкториальные свойства – отношение к разным красителям ГРАМ+ и - (способность окрашиваться и расположение: поодиночке, группами, в цепочку); (установить род и семейство);
в) культуральный –метод культивирования (бактериологич и вирусологич) (установить род и семейство);

1)тип дыхания – аэробный, факультатив.анаэроб
2)тип питания:
нетребовательны к питательным средам- МПА и МПБ- автотрофы;
требовательные к питательным средам – гетеротрофы -элективные пит.среды- кровяной и сывороточный МПА
3)оптимальная температура в термостате (в основном 37; для возб-ля чумы-28, кампилобактерии-42)
4) Время культивирования в основном 18-24 часа; в-ль туберкулеза-месяц и более, в-ль бруцеллеза – около месяца, в-ль туляремии – 2 недели, Legionellapneumonia – 3-5 дней, Bordetellapertusis (коколюш)- 3-4 дня
5)Характер роста колоний:
на твердых питательных средах все образуют *S-колонии- округлой формы, гладкая поверхность, ровный край, *Исключение в-ли туберкулеза, чумы и сибирской язвы- Rформы: округлой или неопределенной формы, неровные края, шероховатая поверхность,
*Proteusvulgaris не дает изолированных колоний, у них H-форма роста-сплошным налетом в виде пленки из-за высокой подвижности- методика Щукевича.
*микоплазмы- яичная глазунья-требовательны, не можем культивировать
6)пигментообразования колоний – пигменты защищают от УФ лучей

Стафилококки- белый, желтый, золотистый
Красные пигменты—актиномицеты,
желтые и оранжевые – микобактерий туберкулеза, сарцины, стафилококки
зеленая – синегнойная палочка при рН 7,2-7,4
бело-голубоватый-vibrocholericae

Коричневые - bacteroidusmelanogenius

Коричневая не только колония, но и вся питательная среда-Legionellapneumophilae
г) биохимический - дифф-диагностические среды, спец реактивы (установить вид)

-сахаролитические и протеолитические свойства патогенных видов

НАПРИМЕР-E.coli:
-реакция на сероводород(отриц-я) на каталазную активность(отриц-я)
-и на индол(полож-я),
-диф.диаг. среды-Гисса, Ресселя(расщепление лактозы до кислоты и газа, изменение цвета всей среды),
-по сахаралитической активности – изменение короткого пестрого ряда- E.coli ферментирует всё с образованием газа и кислоты(красные+ пузырьки), кроме сахарозы(желтая пробирка)
д)серологический (антигенная структура); (установить вид)- РА реакция агглютинации, в котором участвует целая клетка-агглютинин, полож.результат нуж-ся в подтверждении
меч.серологич – структуру АГ-ПЦР
е)по чувствительности к фагам (установить вид)-реакция фаголизиса, монофагами

ж)биологический (вирулентность) – заражение лаб животных (установить вид)
з)генетический– ПЦР, ИФА (установить вид)

5. Морфология бактерий. Основные формы, постоянные и непостоянные структуры бактериальной клетки.

Основные формы бактерий: кокковидные, палочковидные, извитые.
1) Сферические формы, или кокки- шаровидные d=до 1 мкм, которые по взаимному расположению делятся на микрококки, диплококки, стрептококки, тетракокки, сарцины и стафилококки.
Микрококки- отдельно расположенные клетки- деление в одной плоскости, расхождение клеток.
Диплококки или парные кокки, располагаются парами (пневмококк, гонококк, менингококк), так как клетки после деления не расходятся. Пневмококк (возбудитель пневмонии) имеет с противоположных сторон ланцетовидную форму, а гонококк (возбудитель гонореи) и менингококк (возбудитель эпидемического менингита) имеют форму кофейных зерен, обращенных вогнутой поверхностью друг к другу.
Стрептококки - клетки округлой или вытянутой формы, составляющие цепочку вследствие деления клеток в одной плоскости и сохранения связи между ними в месте деления.
Сарцины располагаются в виде пакетов из 8 кокков и более, так как они образуются при делении клетки в трех взаимно перпендикулярных плоскостях.
Стафилококки - кокки, расположенные в виде грозди винограда в результате деления в разных плоскостях.

2) Палочковидные бактерииразличаются по размерам, форме концов клетки и взаимному расположению клеток. Длина - до 10 мкм, толщина - до 2 мкм. Палочки могут быть правильной (кишечная палочка и др.) и неправильной булавовидной (коринебактерии) формы. К наиболее мелким палочковидным бактериям относятся риккетсии.
Концы палочек могут быть как бы обрезанными (сибиреязвенная бацилла), закругленными (кишечная палочка), заостренными (фузобактерии) или в виде утолщения как булавка (коринебактерии дифтерии).
Слегка изогнутые палочки называются вибрионами– 1 изгиб, не превышает четверть оборота(холерный вибрион).
Ветвящиеся - палочковидные бактерии, которые могут иметь разветвление в форме латинской буквы Y, встречающиеся у бифидобактерий, у актиномицетов
Большинство палочковидных бактерий располагается беспорядочно, так как после деления клетки расходятся. Если после деления клетки остаются связанными общими фрагментами клеточной стенки и не расходятся, то они располагаются под углом друг к другу (коринебактерии дифтерии) или образуют цепочку (сибиреязвенная бацилла).

3) Извитые формы- спиралевидные бактерии, которые бывают двух видов:
-Спириллы имеют вид извитых клеток с крупными завитками, большой диаметр (возбудитель содоку (болезнь укуса крыс), а также кампилобактерии и хеликобактерии) как штопор
-Спирохетыпредставляют тонкие длинные извитые бактерии, с более мелкими завитками до 30 шт, и характером движения. Treponema, Borrelia, Leptospira.

Постоянные структурные элементы бактерий: клеточная стенка, рибосома, цитоплазматическая мембрана, нуклеоид, мезасома.

Бактериальную клетку окружает оболочка, состоящая из клеточной стенки и цитоплазматической мембраны. Под оболочкой находится протоплазма, состоящая из цитоплазмы с включениями и наследственного аппарата - аналога ядра, называемогоНУКЛЕОИДОМ.Он расположен в центральной зоне бактерий в виде двунитевой ДНК как клубок, не имеет ядерной оболочки, ядрышка и основных белков (гистонов). У большинства бактерий - одна хромосома, замкнутая в кольцо молекула ДНК. Есть внехромосомные факторы наследственности - плазмиды, представляющие собой ковалентно замкнутые кольца ДНК.
Генетические изменения могут привести к дефектам и к появлению в результате этого «шероховатых» колоний R-форм.

КЛЕТОЧНАЯ СТЕНКА- прочная, упругая структура, придающая бактерии определенную форму. Она участвует в процессе деления клетки и транспорте метаболитов, имеет рецепторы для бактериофагов, бактериоцинов и различных веществ. Наиболее толстая клеточная стенка у грам+. Толщина клеточной стенки грамм- около 15-20 нм, у грам+ 50 нм и более.
Основу клеточной стенки бактерий составляет пептидогликан.

В клеточной стенке грамм+ бактерий содержатся полисахариды, липиды-билипидный слой, белки. Основным компонентом является многослойный пептидогликан (муреин, мукопептид), составляющий 40—90% массы клеточной стенки + ковалентно связанные тейхоевые кислоты (из глицерола и рибитола), соединенных фосфатными мостиками. Форму и прочность бактериям придает жесткая волокнистая структура многослойного, с поперечными пептидными сшивками пептидогликана. Пептидогликан представлен параллельно расположенными молекулами гликана. состоящего из повторяющихся остатков N-ацетилглюкозамина и N-ацетилмурамовой кислоты, соединенных гликозидной связью. Эти связи разрывает лизоцим, являющийся ацетилмурамидазой. Гликановые молекулы соединены через N-ацетилмурамовую кислоту поперечной пептидной связью из четырех аминокислот (тетрапептида).

Способность грамм+ бактерий при окраске по Граму удерживать генциановый фиолетовый в комплексе с йодом (сине-фиолеговая окраска бактерий) связана со свойством многослойного пептидогликана взаимодействовать с красителем. Кроме этого, последующая обработка мазка бактерий спиртом вызывает суживание пор в пептидогликане и тем самым задерживает краситель в клеточной стенке.

У грамм-Пептидогликан в клеточной стенке представлен 1-2 слоями, кнаружи от которого расположен слой липопротеина, соединенный с пептидогликаном через ДАП. За ним следует наружная мембрана клеточной стенки.Тетрапептиды состоят из чередующихся L- и D-аминокислот, например: L-аланин — D-глугаминовая кислота — мезо-ди-амино-пимелиновая кислота — D-аланин. У Е. соli пептидные цепи соединены друг с другом через D-аланин одной цепи и мезо-диаминопимели новую кислоту — другой. Состав и строение пептидном части стабильны.

Грамм- бактерии после воздействия спиртом утрачивают краситель, что обусловлено меньшим количеством пептидогликана, они обесцвечиваются спиртом и при обработке фуксином или сафранином приобретают красный цвет.

ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКАЯ МЕМБРАНАпри электронной микроскопии представляет собой трехслойную мембрану.

Наружная мембрана представлена ЛПС, ФЛ и белками. Внутренний слой ее представлен ФЛ. Белки матрикса наружной мембраны образуют поры, через которые проходят вода и мелкие гидрофильные молекулы. Между наружной и цитоплазматической мембраной находится периплазматическое пространство, содержащая ферменты (протеазы, липазы, фосфатазы.)
ЛПС наружной мембраны состоит из трех фрагментов:
• липида А —обуславливает токсичность т.к. эндотоксин может вызвать шок. у грамм- одинакова
• ядра, или коровой части , относительно консервативной олигосахаридной структуры;
• высоковариабельной О-специфической цепи ПСХда –олигосахаридные последовательности. обусловливают серогруппу, серовар определенного штамма бактерий – О-АГ.

Есть рибосомы –немембранные органоиды, участвующие в синтезе белка, на основе мРНК.
В цитоплазме имеются различные включения в виде гранул гликогена, полисахаридов, β-оксимасляной кислоты и волютин. Они накапливаются при избытке питательных веществ в окружающей среде и выполняют роль запасных веществ для питания и энергетических потребностей.Волютин обладает сродством к основным красителям и легко выявляется с помощью специальных методов окраски (по Нейссеру) в виде метахроматических гранул.

Факультативные (непостоянные) структуры: форма (кокки, палочки, извитые), подвижность (жгутики, аксиальные нити), капсула, споры.

*Жгутики бактерий определяют подвижность бактериальной клетки (только у палочковидных). Это тонкие нити, берущие начало от цитоплазматической мембраны, длиннее клетки, толщина 12-20 нм, длина 3-15 мкм. 3 части: спиралевидные нити, крюк и базальные тельца, со стерженем со специальными дисками. Дисками жгутики прикреплены к цитоплазматической мембране и клеточной стенке.
Жгутики состоят из белка –флагеллина это-АГ - так называемый Н-антиген. Субъединицы флагеллина закручены в виде спирали.
Число жгутиков: от 1-(монотрих) у холерного вибриона, до десятка и сотен, отходящих по периметру бактерии (перитрих), у кишечной палочки, протея и др. Лофотрихи имеют пучок жгутиков на одном из концов клетки-кампилобактерии. Амфитрихи имеют по одному жгутику или пучку жгутиков на противоположных концах клетки- спириллы.
*Аксиальные нити у спирохет
*Ворсинки, или пили (фимбрии) - нитевидные образования, более тонкие и короткие, чем жгутики. Пили отходят от поверхности клетки и состоят из белка пилина.Пили общего типа отвечают за прикрепления к субстрату, питание и водно-солевой обмен.Многие пили являются рецепторами для бактериофагов.

*Споры (у семействаBacillaciaи у вирулентных и у невирулентных) во внешней среде- своеобразная форма покоящихся бактерий у грамм+ рода Bacillus, у которых размер споры не превышает диаметр клетки, называются бациллами - возбудитель Сибирской язвы Bacillusanthracis(в центре спора)
Если размер споры превышает диаметр клетки, как форма веретена, называются род клостридии:Clostridiumbotulinum– ботулизма(теннисные ракетки), Clostridiumperfringens-газовой анаэробной инфекции(веретено), Сlostridiumtetani-столбняка(палочки), и еще Cl. novyi, Cl.histolyiicum, Cl. Septicum.

Споры кислотоустойчивы, поэтому окрашиваются по методу Циля-Нельсена в красный, а вегетативная клетка - в синий цвет.
Спора долго может сохраняться из-за наличия многослойной оболочки, низкого содержания воды и вялых процессов метаболизма. В почве, например, возбудители сибирской язвы и столбняка могут сохраняться десятки лет.

*Капсула (внутри макроорганизма)– только у патогенных м/о, в основном -трехслойный полисахарид или полипептид-у сибиреязвенной бациллы. Ее функции: делает оболочку клетки (состоящей из клеточной стенки и ЦПМ) более плотной и прочной, предохраняет бактерии от воздействия бактерицидных факторов, обеспечивает адгезию на различных субстратах, может содержать запасы питательных веществ.
Классические капсулообразующие полисахаридной природы: Strep.pneumonia, Klebsiella pneumoniae, Cl.perfringens-газов.анаэроб. инфекции, Y.pestis-чумы, Bordetella pertussis-коклюша.

Капсулированные бактерии могут превращаться в бескапсульные варианты и, поскольку первые образуют мукоидные или гладкие (S), а бескапсульные — шероховатые (R) колонии, это явление известно, как S- и R-диссоциация. Капсула и слизистый слой не препятствуют поступлению и выходу различных веществ из бактериальной клетки, а также плохо удерживают красители.
Окраска капсул бактерий. Для облегчения микроскопирования капсулы можно сделать видимыми, проведя негативную окраску мазка по Бурри-Гинсу-тушь создает темный фон вокруг капсулы.

6. Основные характеристики светового микроскопа (разрешающая способность, общее увеличение). Принцип иммерсионного микроскопа.

Световой микроскоп – ϶ᴛο оптическая система, состоящая из конденсора, объектива и окуляра. Пучок света от источника освещения собирается в конденсоре, направляется на объект; пройдя через объект, лучи света попадают в систему линз объектива, они строят первичное изображение, которое увеличивается с помощью линз окуляра.
Разрешающая способность – ϶ᴛο минимальное расстояние между двумя точками, при котором они еще раздельно изображаются данной оптической системой.
Общее увеличение это произведение увеличения объектива на увеличение окуляра.

Иммерсионная микроскопия(от лат. погружение) — метод микроскопического исследования малых объектов с помощью погружения объектива светового микроскопа в среду с высоким коэффициентом преломления, расположенную между микроскопическим препаратом и объективом.
Методика: настраивается максимальное освещение, поднимая до отказа конденсор, полностью открывая диафрагму, нужно установить плоское зеркало; затем повернуть револьвер и поставить объектив с малым увеличением (х 8), опустить его на расстоянии около 0,5 см от предметного столика. Смотря в окуляр, вращать зеркало до тех пор, пока не установиться предварительное освещение.