Лабораторная работа.
«Гидролиз нуклеиновых кислот»
Цель работы. Научиться осуществлять гидролиз биоорганических фракций, содержащих нуклеопротеины, а также идентифицировать компоненты нуклеопротеинов в гидролизате фракций.
Приборы и оборудование. Пробирка для гидролиза; обратный холодильник; пробирки лабораторные; штатив.
Реактивы. Раствор аммиака концентрированный; раствор NaOH (1 моль/л); раствор CuSO4 (10%); раствор AgNO3 (10%); раствор молибдата аммония; растворы серной и азотной кислот (1 моль/л).
Сущность работы. Изучение химического состава нуклеопротеинов удобно проводить на дрожжевых клетках. При непродолжительном гидролизе дрожжевой массы или выделенных из нее нуклеопротеинов последние (нуклеопротеины) распадаются на полипептиды, пуриновые и пиримидиновые основания, рибозу и дезоксирибозу, фосфорную кислоту. Продукты гидролиза могут быть обнаружены специфическими для каждого вещества реакциями.
Ход работы. Опыт 1. Гидролиз фракции, содержащей нуклеопротеины. В пробирку для гидролиза (широкую длинную, снабженную пробкой с обратным холодильником) помещают 0,5 г пекарских дрожжей, добавляют 10 мл 1 М раствора серной кислоты. Пробирку закрывают пробкой с обратным холодильником. Содержимое пробирки кипятят над асбестовой сеткой в течение 60 мин. Затем содержимое пробирки охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через бумажный фильтр.
Опыт № 2. Качественные реакции на компоненты нуклеопротеинов в гидролизате фракции.
1. В пробирку помещают 0,5 мл фильтрата гидролизата и проводят биуретовую реакцию. О результатах наблюдений делают отметку в табл.
Качественные реакции на компоненты нуклеопротеинов
№ опыта | Реактив | Уравнение реакции | Результаты наблюдений |
2. В пробирку помещают 0,5 мл фильтрата гидролизата, добавляют 2 капли концентрированного раствора аммиака, 0,5 мл 10 % раствора нитрата серебра. Через 5 мин наблюдают образование рыхлого бурого осадка. Эта реакция доказывает наличие в растворе пуриновых оснований.
3. В пробирку помещают 0,5 мл фильтрата гидролизата, добавляют 10 капель 1 М раствора гидроксида натрия и 6 капель 10 %раствора сульфата меди (П). Наблюдают появление мути. Содержимое пробирки нагревают до кипения. В табл. __ делают отметку о результатах наблюдений.
4. В пробирку помещают 0,5 мл фильтрата гидролизата, добавляют 2 мл насыщенного раствора молибдата аммония и 1 мл концентрированного раствора азотной кислоты. Содержимое пробирки перемешивают и кипятят 3 — 5 мин. Наблюдают появление лимонно-желтой окраски. Эта реакция доказывает наличие в растворе фосфорной кислоты.
Оформление протокола. В лабораторном журнале должны быть приведены:
1) название работы;
2) цель работы;
3) приборы и оборудование;
4) реактивы;
5) сущность работы;
6) экспериментальные данные;
7) выводы.
ГЛАВА 11. ОМЫЛЯЕМЫЕ И НЕОМЫЛЯЕМЫЕ ЛИПИДЫ.
СТЕРОИДЫ И СТЕРОИДНЫЕ ГОРМОНЫ.
Вопросы к занятию.
1. Липиды, классификация липидов.
2. Основные представители фосфолипидов – фосфатидилэтаноламин (кефалин), фосфатидилхолин (лецитин). Серинфосфатиды и инозитолфосфатиды.
3. Терпены. Моно- и бициклические терпены. Пинен и камфара.
4. Основные группы стероидов:
А) стерины – холестерин и витамины группы Д.
Б) желчные кислоты
В) стероидные гормоны
Дата добавления: 2019-09-30; просмотров: 447;