Определение протеина S
Протеин S - витамин-К-зависимый белок, который является кофактором АПС. Эта функция положена в основу всех известных коммерческих тест-систем определения протеина S. Описаны случаи как функционального, так и количественного дефицита протеина S. При проведении тестов важно помнить, что протеин S присутствует в плазме частично в свободном состоянии, частично в комплексе с С4-связывающим протеином (С4-СП), но активна только свободная форма протеина S.
Определение протеина S коагуляционным методом
Для определения протеина S необходимо использовать тест-систему, содержащую очищенный активный протеин С, его субстрат - фактор Va и дефицитную по протеину S плазму. После инкубации исследуемой плазмы с тест-системой определяют время свертывания, выполняя тест АЧТВ или индуцируя активацию змеиным ядом, фосфолипидами и Са2+ (рис. 117). Удлинение времени свертывания пропорционально активности протеина S. Специфичность метода относительная, так как фактор V Лейден, высокий уровень
ф.VIII и волчаночный антикоагулянт могут существенно влиять на результаты теста, а именно: с этими факторами часто проводят дифференциальную диагностику, определяя протеин S. На результаты влияют качество дефицитной плазмы и препаратов АПС, а также состав фосфолипи-дов, поэтому значения теста зависят от конкретного производителя. Так как коагуляционный метод подвержен действию многих интерферирующих факторов и не стандартизован, то предпочитают использовать иммунохимический метод для определения протеина S.
Определение протеина S иммунохимическим методом
Иммунохимический метод достаточно широко распространен. Первая генерация тест-наборов определяла «общий протеин S», включая свободную форму и форму протеина S, связанную с белком С4-СП. Наборы последних генераций позволяют определять «свободный протеин S» прямо без предварительной обработки. Чаще всего используют турбидиметрический метод с полистироловыми частицами или метод ELISA. Недостатком иммунохимического метода является то, что он выявляет протеолитически неактивные формы протеина S, которые иногда появляются в плазме.
Оценка результатов
Уменьшение содержания (активности) протеина S наблюдается при:
• врожденном (наследственном) дефиците;
• врожденном (наследственном) уменьшении
свободной фракции протеина S;
• заболеваниях печени с нарушением синтети
ческой функции;
• нефротическом синдроме;
• ДВС-синдроме;
Рис. 117. Принцип определения протеина S коагуляционным методом
Обеспечение диагностики нарушений гемостаза в КДЛ
• системной красной волчанке;
• лечении L-аспарагиназой;
• лечении пероральными (непрямыми) антико
агулянтами;
• приеме эстрогенов (пероральных контрацеп
тивов);
• беременности, в послеродовом периоде;
• наличии аутоантител к протеину S.
Относительный дефицит протеина S наблю
дается при повышении С4-СП. С4-СП - белок
острой фазы, его количество повышается в
плазме крови при воспалении, аутоиммунных
реакциях, беременности, у женщин, принима
ющих стероидные контрацептивы. С4-СП оп
ределяют методом иммунотурбидиметрии или
ELISA.
Дата добавления: 2016-08-06; просмотров: 1979;