Б) Гель фильтрация на молекулярных ситах.

Этот метод позволяет разделять белки с различными молекулярными массами, пропуская их растворы через колонки, наполненные так называемыми молекулярными ситами.

Молекулярные сита – это гранулы различных пористых нерастворимых материалов (полисахариды, синтетические смолы, пористое стекло) (рис. 5-29). Поры в гранулах определённого размера, поэтому молекулы, меньшие чем размеры пор, проникают в них, а более крупные минуют гранулы, не задерживаясь. В результате, более крупные молекулы быстрее пройдут слой молекулярного сита, чем меньшие молекулы, и произойдёт их разделение по величине и молекулярной массе.

Рис. 5-29. Схема, показывающая «просеивание» частиц разной величины через гранулы сефадекса

Растворы, содержащие молекулы белков разной массы, пропускают через колонки, заполненные какими-либо пористыми материалами (например, сефадексом) и по скорости прохождения молекул через колонку определяют приблизительную молекулярную массу белков (рис. 5-30).

Рис. 5-30. Принцип действия колонок, заполненных гранулами сефадекса