Лабораторные методы исследования молока.

Биохимический анализ сыворотки крови проводят в ветеринарной лаборатории, а затем используют эти данные при составлении рациона кормления больных маститом. Лабораторный анализ секрета молочной железы предусмат­ривает определение цвета, консистенции, запаха, сгустков и хлопьев (проба отстаивания), щелочности (пробы с индикатор­ными карточками, бромтимоловым синим, мастидином и димастидином), примеси лейкоцитов (лейкоцитарная проба), крови. Кроме того, в секрете вымени можно выявить ферменты (каталаза, редуктаза), содержание лизоцима (мурамидазы) и др.

Диагностика субклинического (скрытого) мастита. Вы­даивают секрет в лунки молочно-контрольной пластинки с последующим добавлением одного из реактивов (2% мастидин, 2% мастотест Воронежский, 5% димастин или 2,5% сульфанол). Густоватый в начале секрет при смешивании с реактивом становится жидким. О наличии скрытого мастита свидетельствует образование сгустка. Секрет здоровых животных сгустка не образует. Также диагностируют путем исследования мо­лока с одним из быстрых диагностических тестов (БМТ) - пробы с димаститом, мастидином, мастотестом Воронежским и др. Действие быстрых маститных тестов основано на выявлении увеличенного количества лейкоци­тов и изменения рН молока.

Диагностика мастита в запускной и сухостойный периоды. В по­следний день запуска всех коров исследуют клинически. При отсутствии кли­нических признаков (увеличение доли, болезненность, изменение секрета, по­вышение местной температуры) болезни исследуют секрет из каждой доли вымени по быстрому маститному тесту и пробой отстаивания. В сухостойный период коров исследуют на мастит дважды: первый раз через 10-15 дней от начала сухостоя, второй - за 10-15 дней до отела при пе­реводе животных в родильное отделение. При выявлении клинических при­знаков заболевания проводят пробное доение. В течение первых 20-30 дней сухостойного периода в вымени здоровых коров секрет жидкий, серовато-белого цвета однородной консистенции без каких-либо включений. Во второй половине периода секрета в вымени мало (3-5 см³), он вязкий, тягучий, клейкий (медообразный), желто-коричневого цвета (редко секрет серовато-белого цвета), иногда секрет выдоить не удается. Наличие клинических признаков или изменения количества и внешнего вида секрета свидетельствует о клинически выраженном мастите.

73. Правила хранения, оттаивания, использования и оценки качества спермы, сохраненной при температуре –196⁰С.

Метод предусматривает использование замороженной в жидком азоте спермы. Срок годности спермы практически не ограничен.

При использовании для искусственного осеменения замороженной спермы, необходимо соблюдать определенные зооветеринарные требования.

Центры по криоконсервации спермы собак работают во многих странах мира и используют практически одинаковые методы её замораживания, но при этом применяют различные синтетические разбавители, в том числе и патентованные.

Сперму кобелей обычно замораживают в виде гранул объёмом 0,2 мл или в полипропиленовых соломинках объемом 0,25 мл. Преимуществами замораживания спермы в соломинках являются лучшие условия стерильности и возможность их маркировки данными о производителе: порода, кличка, дата взятия семени и т.д.

Оттаивают сперму , замороженную в гранулах, при 37°С в изотонических растворах, а соломинки – в водяной бане при 35-37°С.

При использовании замороженной спермы на оплодотворяемость сук оказывают влияние многие факторы: состав синтетической среды, качество спермы, температура ее оттаивания, число биологически полноценных спермиев в дозе, время осеменения, техника осеменения и место введения спермы в поло­вые пути суки.

В дозе спермы перед замораживанием должно содержаться не менее 150-200 млн подвижных спермиев.

Сразу после получения и оценки, эякулят разбавляют в 2-3 раза специальным криозащитным разбавителем, содержащим различные вещества, предохраняющие спермии от повреждений во время замораживания. В частности, в их состав обязательно входят глицерин и желток куриного яйца.

Состав разбавителя:

ТРИС 6,06 гр; фруктоза 2,5 гр: лимонная кислота 3,4 гр; дистиллированная вода 184 гр; глицерин 8 гр; желток 20 гр; трициллин 0,5 гр.

После разбавления сперму охлаждают в холодильнике в течение 2-3 часов до +4°С, а затем замораживают с использованием жидкого азота до температуры -196°С.

При хранении замороженной спермы в жидком азоте (в сосуде Дьюара), она способна сохранять биологическую полноценность в течение многих десятков лет.

Поскольку, в процессе замораживания-оттаивания разрушается до 50% спермиев, желательно вводить дозу непосредственно в полость матки. Процент положительных результатов до 60%.