С использованием встряхивания на качалке
4. Производят загрузку расплодки гриба и необходимых компонентов питательной среды в специальные реакторы для ферментации (рис. 7.8). При изготовлении нативных антибиотиков ферментация протекает 24-36 ч. Через каждые 6-12 ч из ферментатора отбирают пробу для проверки антибиотика на активность. В процессе развития грибка в ферментаторе накапливаются газообразные продукты его жизнедеятельности, которые удаляются через шланг.
А В
Рис. 7.8. Реактор для ферментации антибиотиков (А),
загрузка расплодки гриба и питательной среды (В).
5. По окончании процесса ферментации культуральную жидкость проверяют на активностьпреимущественно следующими микробиологическими методами:
1. Перпендикулярных штрихов;
2. Бумажных дисков;
3. Незапаянных цилиндриков.
Метод перпендикулярных штрихов на агаре заключается в том, что вырезанную в питательной среде канавку заполняют средой с антибиотиком. Перпендикулярно канавке засевают различные виды микроорганизмов. Длина белых полосок указывает на неодинаковую чувствительность микробов к антибиотику (рис. 7. 9; А).
А В С
Рис. 7.9. Оценка антибиотиков на биологическую активность методами: перпендикулярных штрихов (А), по бумажных дисков (В), незапаянных цилиндриков (С)
Метод бумажных дисков заключается в том, что на питательную среду, засеянную микробами, накладывают диски из фильтровальной бумаги, пропитанные антибиотиком. В центре чашки Петри наложен диск без антибиотиков (контрольный). Вокруг дисков с антибиотиками роста микроорганизмов не наблюдается на диаметр, характеризующий степень активности данного антибиотика по отношению к патогенным формам микроорганизмов (зона угнетения, рис. 7.9; В).
Метод незапаянных цилиндриков заключается в том, что в питательную среду, засеянную бактериями, погружают стеклянные или металлические незапаянные цилиндрики, которые заполняют антибиотиками. Ширина зоны угнетения, распространяющаяся снизу по диаметру от них, указывает на антимикробные свойства антибиотиков (рис. 7.9; С).
Антибиотики выпускаются в жидком и сухом виде. После проверки на активность их расфасовывают в соответствующую посуду и этикетируют (рис. 7.10).
Минская областная
Дата добавления: 2016-05-28; просмотров: 1651;