Семейство Bunyaviridae (буньявирусы).

Буньявирусы - сферические оболочечные вирусы с тремя нуклеокапсидами, содержащими по три линейных фрагмента негативной РНК. Оболочка липопротеидная, имеет гликопротеидные шипы, проявляющие гемагглютинирующие свойства.

Наибольшее распространение на территории России имеют вирусы рода Hantavirus. Хантавирусы Хантаан, Добрава, Пуумала, Сеул и другие вызывают геморрагическую лихорадку с почечным синдромом (ГЛПС).

ГЛПС - тяжелое природноочаговое зоонозное нетрансмиссивное заболевание, характеризующееся лихорадкой, геморрагическим синдромом, почечной недостаточностью, возможен легочной синдром. Наиболее эпидемически активные очаги выявлены на Дальнем Востоке (восточная часть нозоареала), в Европейском части России и на Урале (западная часть нозоареала). ГЛПС - одна из наиболее распространенных и тяжелых природноочаговых инфекций.

Основной резервуар и источник заражения хантавирусами - мелкие млекопитающие (особенно - рыжие полевки, наибольшая численность которых отмечена в липовых лесах). Заражение человека может происходить при прямом или опосредованном (загрязненная экскрементами грызунов почва, пищевые продукты, вода) контакте, в том числе аэрогенным путем (вдыхание инфицированной пыли).

Иммунитет. Постинфекционный, стойкий, пожезненный, смешанный (?).

Лабораторная диагностика. Исслед материал- мокрота, смыв носоглотки.. Вирусологическая диагностика заражение культур кл, лабораторных животных.вирус можно выявить в паренхиматозных органах с помощью МФА с моноклональными антителами. Преимущественно используют серологическую диагностику - реакцию непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ) с инфицированными вирусом клеточными культурами, исследуют парные сыворотки в динамике инфекционного заболевания.

Лечение - преимущественно патогенетическое, направленное на основные клинические синдромы. При острой почечной недостаточности, уремии и геморрагическом нефрозонефрите необходим гемодиализ.

43.Ретровирус. ВИЧ, строение, особенности генома и репродукции. Изменчивость и ее механизм. Эпидемиология. Патогенез ВИЧ-инфекции, характеристика взаимодействия с чувствительными клетками. Иммунологические нарушения и иммунитет, механизмы возникновения клинических проявлений СПИДа и вторичных болезней. Клинические стадии. Принципы и методы микробиологической диагностики. Основные тестовые и экспертные реакции диагностики ВИЧ-инфекции.

Вирус иммунодефицита человека вызывает ВИЧ-инфекцию, заканчивающуюся развитием синдрома приобретённого иммунного дефицита.

Возбудитель ВИЧ-инфекции — лимфотропный вирус, относящийся к семейству Retroviridae роду Lentivirus.

Морфологические свойства: РНК-содержащий вирус. Вирусная частица сферической формы Оболочка состоит из двойного слоя липидов, пронизанного гликопротеинами. Липидная оболочка происходит из плазматической мембраны клетки хозяина, в которой репродуцируется вирус. Гликопротеиновая молекула состоит из 2 субъединиц, находящихся на поверхности вириона и пронизывающих его липидную оболочку.

Сердцевина вируса конусовидной формы, состоит из капсидных белков, ряда матриксных белков и белков протеазы. Геном образует две нити РНК, для осуществления процесса репродукции ВИЧ имеет обратную транскриптазу, или ревертазу.

Геном вируса состоит из 3 основных структурных генов и 7 регуляторных и функциональных генов. Функциональные гены выполняют регуляторные функции и обеспечивают осуществление процессов репродукции и участие вируса в инфекционном процессе.

Вирус поражает в основном Т-лимфоциты, некоторые клетки моноцитарного ряда (макрофаги, лейкоциты), клетки нервной системы.

Культуральные свойства: на культуре клеток Т-лимфоцитов и моноцитов человека (в присутствии ИЛ-2).

Антигенная структура: 2 типа вируса — ВИЧ-1 и ВИЧ-2 ВИЧ-1, имеет более 10 генотипов (субтипов): А, В, С, D, E, F…, отличающихся между собой по аминокислотному составу белков.

ВИЧ-1 делят на 3 группы: М, N, О. Большинство изолятов относится к группе М, в которой выделяют 10 подтипов: А, В, С, D, F-l, F-2, G, Н, I, К. Устойчивость: Чувствителен к физическим и химическим факторам, гибнет при нагревании. Вирус может длительно сохраняться в высушенном состоянии, в высохшей крови.

Факторы патогенности, патогенез: Вирус прикрепляется к лимфоциту, проникает в клетку и репродуцирует в лимфоците. В результате размножения ВИЧ в лимфоците последние разрушаются или теряют свои функциональные свойства. В результате размножения вируса в различных клетках происходит накопление его в органах и тканях, и он обнаруживается в крови, лимфе, слюне, моче, поте, каловых массах.

При ВИЧ-инфекции снижается число Т-4-лимфоцитов, нарушается функция В-лимфоцитов, подавляется функция естественных киллеров и ответ на антигены снижается и нарушается продукция комплемента, лимфокинов и других факторов, регулирующих иммунные функции (ИЛ), в результате чего наступает дисфункция иммунной системы.

Клиника: поражается дыхательная система (пневмония, бронхиты); ЦНС (абсцессы, менингиты); ЖКТ (диареи), возникают злокачественные новообразования (опухоли внутренних органов).

ВИЧ-инфекция протекает в несколько стадий: 1) инкубационный период, составляющий в среднем 2—4 недели; 2) стадия первичных проявлений, характеризующаяся вначале острой лихорадкой, диареей; завершается стадия бессимптомной фазой и персистенцией вируса, восстановлением самочувствия, однако в крови определяются ВИЧ-антитела, 3) стадия вторичных заболеваний, проявляющихся поражением дыхательной, нервной системы. Завешается ВИЧ-инфекция последней, 4-й терминальной стадией- СПИДом.

Микробиологическая диагностика.

Вирусологические и серологические исследования включают методы определения антигенов и антител ВИЧ. Для этого используют ИФА, ИБ и ПЦР. Сыворотки больных ВИЧ-1 и ВИЧ-2 содержат антитела ко всем вирусным белкам. Однако для подтверждения диагноза определяют антитела к белкам gp41, gpl20, gpl60, p24 у ВИЧ-1 и антитела к белкам gp36, gpl05, gpl40 у ВИЧ-2. ВИЧ-антитела появляются через 2—4 недели после инфицирования и определяются на всех стадиях ВИЧ.

Метод выявления вируса в крови, лимфоцитах. Однако при любой положительной пробе для подтверждения результатов ставится реакция ИБ. Применяют также ПЦР, способную выявлять ВИЧ-инфекцию в инкубационном и раннем клиническом периоде, однако ее чувствительность несколько ниже, чем у ИФА.

Клинический и серологический диагнозы подтверждаются иммунологическими исследованиями, если они указывают на наличие иммунодефицита у обследуемого пациента.

Диагностическая иммуноферментная тест-система для определения антител к ВИЧ – включает вирусный АГ, адсорбированный на носителе, АТ против Ig человека. Используется для серодиагностики СПИДа.

Лечение: применение ингибиторов обратной транскриптазы, действующих в активированных клетках. Препараты являются производные тимидина — азидотимидин и фосфазид.

Профилактика. Специфическая - нет.

44. Пикорнавирусы. Вирус полиомиелита. Характеристика. Антигеная структура. Серотипы. Эпидемиология. Клинические формы. Патогенез. Иммунитет. Принципы и методы микробиологической диагностики. Спецефическая профилактика.

Таксономия.: семейство Picornaviridae, род Enterovims, вид Poliovirus.

Структура. По структуре полиовирусы — типичные представители рода Enterovirus. РНК-содержащие вирусы.

Морфология: мелкие, просто организованные вирусы, сферической формы, состоят из одноцепочечной РНК и капсида.

Культивирование: Хорошо репродуцируются в первичных и перевариваемых культурах клеток из тканей человека и сопровождается цитопатическим эффектом. В культуре клеток под агаровым покрытием энтеровирусы образуют бляшки.

Антигенные свойства: Различают 3 серотипа внутри вида: 1, 2, 3, не вызывающие перекрёстного иммунитета. Все серотипы патогенны дл человека.

Основными группами риска являются гомосексуалисты, наркоманы, проститутки, реципиенты крови, медицинские работники. Группу повышенного риска составляют лица, практикующие незащищенный анальный секс; наркоманы, употребляющие инъекционные наркотики, а также их половые партнёры.

ВИЧ не передается через укусы насекомых, через воду и пищу, через воздух при кашле и чихании, с потом и слезной жидкостью, при рукопожатии, при поцелуях, через посуду, одежду, при пользовании ванной, туалетом, плавательным бассейном

Патогенез и клиника. Естественная восприимчивость человека к вирусам полиомиелита высокая. Входными воротами служат слизистые оболочки верхних дыхательных путей и пищеварительного тракта. Первичная репродукция вирусов происходит в лимфатических узлах глоточного кольца и тонкой кишки. Из лимфатической системы вирусы проникают в кровь, а затем в ЦНС, где избирательно поражают клетки передних рогов спинного мозга (двигательные нейроны). Инкубационный период продолжается в среднем 7—14 дней. Различают 3 клинические формы полиомиелита: паралитическую, менингеальную (без параличей), абортивную (легкая форма). Заболевание начинается с повышения температуры тела, общего недомогания, головных болей, рвоты, болей в горле.

Иммунитет. После перенесенной болезни остается пожизненный типоспецифический иммунитет. Иммунитет определяется наличием вируснейтрализующих антител, среди которых важная роль принадлежит местным секреторным антителам слизистой оболочки глотки и кишечника (местный иммунитет). Пассивный естественный иммунитет сохраняется в течение 3—5 недель после рождения ребенка.

Микробиологическая диагностика. Материал для исследования - кал, отделяемое носоглотки, при летальных исходах — кусочки головного и спинного мозга, лимфатические узлы.

Вирусы полиомиелита выделяют путем заражения исследуемым материалом первичных и перевиваемых культур клеток. О репродукции вирусов судят по цитопатическому действию. Идентифицируют выделенный вирус с помощью типоспецифических сывороток в реакции нейтрализации в культуре клеток. Важное значение имеет внутривидовая дифференциация вирусов, которая позволяет отличить патогенные штаммы от вакцинных штаммов, выделяющихся от людей, иммунизированных живой полиомиелитной вакциной. Различия между штаммами выявляют с помощью ИФА, реакции нейтрализации цитопатического действия вируса в культуре клеток со штаммоспецифической иммунной сывороткой, а также в ПЦР.

Серодиагностика основана на использовании парных сывороток больных с применением эталонных штаммов вируса в качестве диагностикума. Содержание сывороточных иммуноглобулинов классов IgG, IgA, IgM определяют методом радиальной иммунодиффузии по Манчини.

Лечение. Патогенетическое. Применение гомологичного иммуноглобулина для предупреждения развития паралитических форм ограничено.

Профилактика. Основной мерой профилактики полиомиелита является иммунизация. Первая инактивированная вакцина для профилактики – создавала общий гуморальный иммунитет, не формировала местной резистентности слизистых оболочек ЖКТ, не обеспечивала надежную защиту.

Пероральная живая культуральная вакцина из трех серотипов штаммов. Используют для массовой иммунизации детей, она создает стойкий общий и местный иммунитет.

Неспецифическая профилактика сводится к санитарно-гигиеническим мероприятиям.

46. Группа гепатита Е вирусов. Вирус гепатита Е. Характеристика. Эпидемиология, патогенез. Принципы и методы лабораторной диагностики. Специфические маркеры вируса. Специфическая профилактика.

Гепатит Е

Антропоноз, фекально – оральным механизмом передачи.

Таксономия: семейство Caliciviridae. Недавно переведен из семейства в группу гепатит Е-подобных вирусов.

Структура. Вирион безоболочечный, сферический. Геном — однонитевая плюс-РНК, которая кодирует ДНК-зависимую РНК-полимеразу, папаинподобную протеазу и трансмембранный белок, обеспечивающий внедрение вируса в клетку.

Эпидемиология, клиника. Источником является больные люди. Основной путь передачи —фекально-оральный. Инкубационный период 2—6 недели. Поражение печени, интоксикацией, желтухой.

Иммунитет. После перенесенного заболевания стойкий, пожизненный смешанный (гуморал).

Микробиологическая диагностика: Исследуемый материал –кровь.1) серологический метод — в сыворотке, плазме крови с помощью ИФА определяют: антитела к вирусу (анти-HEV IgM, анти-HEV IgG); 2) молекулярно-генетический метод — применяют ПЦР для определения РНК вируса (HEV RNA) в кале и в сыворотке крови больных в острой фазе инфекции.

Лечение. Симптоматическое. Беременным рекомендуется введение специфического им-муноглобулина.

Профилактика. Неспецифическая профилактика - улучшение санитарно-гигиенических условий и снабжение качественной питьевой водой. Созданы неживые цельновирионные вакцины, раз-рабатываются рекомбинантные и живые вакцины.

47. Гепаднавирус. Вирус гепатита В. Свойства, антигены и генотипы. Эпидемиология, патогенез. Иммунитет. Осложнения. Принципы и методы лабораторной диагностики. Специфические маркеры вируса. Специфическая профилактика.

Вирус гепатита В - семейство Hepadnaviridae род Orthohepadnavirus.

Морфология: ДНК-содержаший вирус сферической формы. Состоит из сердцевины, состоящей из 180 белковых частиц, составляющих сердцевинный НВс-антиген и липидсодержащей оболочки, содержащей поверхностный HBs-антиген. Внутри сердцевины находятся ДНК, фермент ДНК-полимераза, обладающая ревертазной активностью, и концевой белок НВе-антиген.

Геном представлен двунитевой ДНК кольцевой формы.

Культуральные свойства. Не культивируется на куриных эмбрионах, не обладает гемолитической и гемагглютинирующей активностью. ВГВ культивируется только в культуре клеток.

Резистентность. Высокая к факторам окружающей среды и дезинфицирующим веществам. Вирус устойчив к длительному воздействию кислой среды, УФ-излучению, действию спирта, фенола.

Антигенная структура. Сложная. В суперкапсиде вируса находится HBs-антиген, который ло-кализован в гидрофильном слое на поверхности вириона. В формировании HBs-антигена участвуют 3 полипептида в гликозилированной форме:preSl — большой полипептид; preS2 — средний полипептид; S — малый полипептид.

Эпидемиология: Развитие инфекционного процесса при попадании в кровь. Заражение происходит при парентеральных манипуляциях (инъекциях, хирургических вмешательствах), переливании крови.

Патогенез и клиника заболевания. Инкубационный период 3—6 месяцев. Инфекционный процесс наступает после проникновения вируса в кровь. ВГВ из крови эндоцитозом проникает в гепатоцит. После проникновения вируса происходит достраивание плюс-нити ДНК ДНК-полимеразой до пол-ноценной структуры. Клиническая картина характеризуется симптомами поражения печени, в большинстве случаев сопровождается развитием желтухи.

Иммунитет. Гуморальный иммунитет, представленный антителами к HBs-антигену, защищает гепатоциты от вируса, элиминируя его из крови.

Клеточный иммунитет освобождает организм от инфицированных гепатоцитов благодаря цитолитической функции Т-киллеров. Переход острой формы в хроническую обеспечивается наруше-нием Т-клеточного иммунитета.

Микробиологическая диагностика. Используют серологический метод и ПЦР. Методами ИФА и РНГА в крови определяют маркеры гепатита В: антигены и антитела. ПЦР определяют наличие вирусной ДНК в крови и биоптатах печени. Для острого гепатита характерно обнаружение HBs антигена, НВе антигена и анти-HBc-IgM антитела.

Лечение. Использование интерферона, интерфероногенов: виферона, амиксина, ингибитора ДНК-полимеразы, препарата аденинрибонозида.

Профилактика. Исключение попадания вируса при парентеральных манипуляциях и переливаниях крови (применением одноразовых шприцев, проверкой на гепатит В по наличию HBs-антигена в крови доноров крови).

Специфическая профилактика осуществляется вакцинацией рекомбинантной генно-инженерной вакциной, содержащей HBs-антиген. Вакцинации подлежат все новорожденные в первые 24 часа жизни. Длительность поствакцинального иммунитета — не менее 7 лет.

48.Флавивирус. Вирус гепатита С. Свойства. Антигеная структура. Серотипы и генотипы. Эпидемиология. Особенности патогенеза и иммунитета. Осложнения. Принципы и методы лабораторной диагностики. Специфические маркеры вируса.
Вирус гепатита С относится к семейству Flaviviridae роду Hepacivirus.
Морфология. Сложноорганизованный РНК-содержащим вирус сферической формы. Геном представлен одной линейной «+» цепью РНК, обладает большой вариабельностью.
Антигенная структура. Вирус обладает сложной антигенной структурой. Антигенами являются:

1. Гликопротеины оболочки

2. Сердцевинный антиген НСс-антиген

3. Неструктурные белки.

Культуральные свойства. ВГС не культивируется на куриных эмбрионах, не обладает гемолитической и гемагглютинирующей активностью.

Резистентность. чувствителен к эфиру, УФ-лучам, нагреванию до 50С.

Эпидемиология. Заражение ВГС аналогично заражению ВГВ. Наиболее часто ВГС передается при переливаниях крови, трансплацентарно, половым путем.

Клиника: Часто встречаются безжелтушные формы, течение инфекции в острой форме, в 50 % случаев процесс переходит в хроническое течение с развитием цирроза и первичного рака печени.

Источником инфекции больной и носитель. Путь передачи трансфузионный и половой.

Иммунитет непрочный, возможно повторное заражние.

Микробиологическая диагностика: Используются ПЦР и серологическое исследование. Подтверждением активного инфекционного процесса является обнаружение в крои вирусной РНК ПЦР. Серологическое исследование направлено на определение антител к NS3 методом ИФА.

Профилактика и лечение. Для профилактики – тоже, что и при гепатите В. Для лечения применяют интерферон и рибовирин. Специфическая профилактика – нет.

49.Вирус гепатита D. Свойства. Антигеная структура. Эпидемиология. Особенности патогенеза. Иммунитет. Осложнения. Принципы и методы лабораторной диагностики. Специфические маркеры вируса.
Вирус гепатита D - дефектный вирус, не имеющий собственной оболочки. Вирион имеет сферическую форму, который состоит из однонитчатой РНК и сердцевинного HDc-антигена. Эти белки регулируют синтез генома вируса: один белок стимулирует синтез генома, другой — тормозит. Различают три генотипа вируса. Все генотипы относятся к одному серотипу.

Резервуаром BFD в природе являются носители ВГВ. Заражение BFD аналогично инфицированию ВГВ.

Антигенная структура- АГ сердцев HDC-АГ состоит из 2 белка

Источником инфекции больной и носитель. Путь передачи- усугубляет гепатит В.

Иммунитет противовирусный и смешанный.

Микробиологическая диагностика осуществляется серологическим методом путем определения антител к BFD методом ИФА.

Профилактика: все те мероприятия, которые используют для профилактики гепатита В. Для лечения используют препараты интерферона. Вакцина против гепатита В защищает и от гепатита D.

50. Аденовирусы. Свойства, антигенная структура, персистенция, онкогенность. Клинические формы аденовирусной инфекции. Эпидемиология. Иммунитет. Принципы и методы лабораторной диагностики.

АДЕНОВИРУСЫ

Таксономия Adenoviridae

Род Mastadenovirus (вирусы млекопитающих) – около 80 сероваров, 41 – патогенны для человека.

Род Aviadenovirus (вирусы птиц)

Морфология и основные антигены Простые вирусы, форма – икосаэдра (252 капсомера), диаметр 70 – 90 нм; от 12 вершин икосаэдра отходят фибры (нити).

Двухцепочечная линейная ДНК, связываясь с протеинами, формирует плотную серцевину вируса – характерную структуру, видимую при электронной микроскопии.

Антигены:

1. Нуклеокапсид – группоспецифический

2. Гликопротеиновые нити (гемагглютинин) – типоспецифические

Эпидемиология и профилактика Источник инфекции - больной человек, в том числе со скрытой ее формой.

Заражение происходит воздушно-капельным, контактно-бытовым путем, через воду в плавательных бассейнах. Возможен и фекально-оральный механизм передачи.

Болеют в основном дети младшего возраста.

Против некоторых серотипов получены иммуногенные вакцины, но широкого применения не получили.

Клиника и иммунитет Тропизм к лимфоидной ткани -- свойство аденовирусов. Инкубационный период 6-9 дней.

Для заболеваний характерно преобладание респираторного (пневмонии, бронхиолиты, другие ОРВИ – серовары 1-7), кишечного (гастроэнтериты – серовары 40,41) или конъюнктивального синдрома (фагингоконъюнктивиты). Также геморрагические циститы (11,21), менингоэнцефалиты (2,6), генерализованные инфекции (34,35,39).

По типу поражений чувствительных клеток выделяют:

1. Продуктивная инфекция

2. Персистентная инфекция (хроническая или латентная/бессимптомная) - инфекцию с длительным персистированием в лимфоидных тканях (хронические ангины, гаймориты, тонзиллиты)

3. Трансформирующая инфекция (при заражении новорожденных грызунов вирусы вызывают опухоли, для человека данный факт не установлен)

Постинфекционный иммунитет стойкий, длительный, но типоспецифический.

Лабораторная диагностика Материал для исследования: отделяемое носоглотки и конъюнктивы, кровь, испражнения.

1. Экспресс-диагностика - Выявление вирусных Аг в пораженных тканях в ИФА и РИФ.

2. Вирусологический метод: Для изоляции вируса лучше всего использовать диплоидные клетки эмбриона человека. Вирусы обнаруживают по их цитопатическому эффекту. Аденовирусы хорошо размножаются в культурах клеток различного происхождения, вызывая два типа цитопатических изменений:

- округление клеток и образование из них гроздевидных скоплений, которые вскоре отслаиваются от стекла;

- мелкоточечную дегенерацию, с образованием мелких круглых клеток, диффузно располагающихся по всему монослою.

Идентификацию проводят с помощью РТГА и РН в культуре клеток с типоспецифическими Ат.

3.Серодиагностика - Выявление нарастания титра антител в парных сыворотках больного с помощью РСК, РТГА или РН в культуре клеток.

51. Вирус простого герпеса. Таксономия, свойства. Вирусы герпеса 1 и 2 типов, вызываемые ими инфекции. Особенности герпетической инфекции. Эпидемиология. Особенности иммунитета. Принципы и методы лабораторной диагностики, специфическая профилактика и лечение.

Таксономия HERPESVIRIDAE семейство

1. Alphaherpesvirinae подсемейство (короткий цикл репродукции, быстрый рост, вирусы размножаются в эпителиальных клетках, вызывая цитолитическую продуктивную инфекцию, а в нейронах – персистирующую (хроническую или латентную инфекции)

►Вирус простого герпеса 1 типа (ГВЧ-1): лабиальный герпес, острый гингивостоматит, герпес кожи и слизистых, офтальмогерпес, фарингит, герпетическая экзема, герпетический энцефалит, пневмонии, возможно, генитальный герпес также. Особенность – персистируют длительное время в задних рогах спинного мозга и узлах тройничного нерва и периодически при ослаблении иммунитета вызывают рецидивы.

►Вирус простого герпеса 2 типа (ГВЧ-2): генитальный герпес, неонатальный герпес, диссеминированный герпес, играет роль в этиологии рака шейки матки. Особенность – персистируют длительное время в ганглиях крестцового отдела спинного мозга.

Морфология

и основные антигены Крупные и сложные оболочечные вирусы сферической формы. Геном представлен линейной двухнитевой ДНК. Типоспецифическими антигенами являются гликопротеины наружной оболочки.

Репродукция вируса происходит в ядре клетки (приводит к фрагментации хроматина и даже полному разрушению ядра). Индуцируют образование синцития.

По типу поражений чувствительных клеток выделяют:

1. Продуктивная инфекция

2. Персистентная инфекция (хроническая или латентная/бессимптомная) - инфекцию с длительным персистированием в лимфоидных тканях и нервной системе

3. Трансформирующая инфекция (онкогенная трансформация заражённых клеток, особенно ВГЧ-2, ЭБВ, ВГЧ-8)

Эпидемиология, иммунитет и профилактика Единственный хозяин – человек.

Пути передачи: ВГЧ-1 (воздушно-капельный и контактный), ВГЧ-2 (половой),

Лабораторная диагностика Диагностика инфекций простого герпеса

А) РАННЯЯ ДИАГНОСТИКА

1. Цитологический метод (соскоб из эпителия окрашивают по Романовскому-Гимзе и обнаруживают гигантские многоядерные клетки с внутриядерными включениями).

2. Экспресс-метод: РИФ для выявления антигенов.

3. Вирусологический метод: для выделения вируса используют

- куриные эмбрионы (заражают на хорион-аллантоисную оболочку, на которой появляются «оспины»)

- различные культуры клеток (типичное ЦПД – многоядерные клетки с внутриядерными включениями и круглоклеточная дегенерация)

- мышата-сосунки в мозг (гибель животных) или кролики в роговицу (кератит).

Идентификацию проводят в РН или РИФ.

Б) ПОЗДНЯЯ ИЛИ РЕТРОСПЕКТИВНАЯ ДИАГНОСТИКА

4. Серодиагностика (ИФА или РСК в парных сыворотках). Серодиагностика (РН, РСК, ИФА) ввиду значительной инфицированности популяции не представляет существенной диагностической ценности.

52.Вирус ветряной оспы и опоясывющего лишая. Таксономия. Характеристика. Эпидемиология. Особенности иммунитета. Принципы и методы лабораторной диагностики. Специфическая профилактика.

HERPESVIRIDAE семейство

1. Alphaherpesvirinae подсемейство (короткий цикл репродукции, быстрый рост, вирусы размножаются в эпителиальных клетках, вызывая цитолитическую продуктивную инфекцию, а в нейронах – персистирующую (хроническую или латентную инфекции)

►Вирус ветряной оспы – опоясывающего герпеса (Varicella-Zoster virus VZV) или ГВЧ-3: ветряная оспа, опоясывающий лишай (рецидив на фоне иммунодефицита).

Крупные и сложные оболочечные вирусы сферической формы. Геном представлен линейной двухнитевой ДНК. Типоспецифическими антигенами являются гликопротеины наружной оболочки.

Репродукция вируса происходит в ядре клетки (приводит к фрагментации хроматина и даже полному разрушению ядра). Индуцируют образование синцития.

По типу поражений чувствительных клеток выделяют:

1. Продуктивная инфекция

2. Персистентная инфекция (хроническая или латентная/бессимптомная) - инфекцию с длительным персистированием в лимфоидных тканях и нервной системе

3. Трансформирующая инфекция (онкогенная трансформация заражённых клеток, особенно ВГЧ-2, ЭБВ, ВГЧ-8)

Единственный хозяин – человек.

Пути передачи: ветряная оспа (воздушно-капельный и реже контактный).

Вирусологическая диагностика ветряной оспы и опоясывающего лишая

1. Выделение вируса в культуре клеток с последующей идентификацией в РСК.

2. Серодиагностика – РСК (парные сыворотки).

3. Вирусоскопия обрботанных по Морозову мазков из содержимого везикул (тельца Арагана).

53.Поксвирус. Вирус натуральной оспы. Свойства. Тельца Гварниери. Эпидемиология. Патогенез. Принципы лабораторной диагностики. Специфическая профилактика

Таксономия. Вирус натуральной оспы — ДНК-содержащий, семейство Poxviridae, род Orthopoxvirus.

Морфология и антигенная структура. Вирионы поксвирусов имеют кирпичеобразную или овоидную форму. Вирус натуральной оспы — один из самых крупных вирусов, обнаружен в световом микроскопе. Вирионы видны при специальных методах окраски в виде так называемых элементарных телец Пашена (окраска серебрением по Морозову). Поверхность вириона состоит из нитевидных, овоидных элементов. Оболочка и наружная мембрана вириона заключают сердцевину (ДНК и белки) и мембрану сердцевины. Геном вириона — двунитевая линейная ДНК с ковалентно замкнутыми концами. Вирусы имеют более 30 структурных белков. Антигены — нуклеопротеиновый, растворимые и гемагглютинин; имеются общие антигена с вирусом вакцины.

Культивирование. Вирус размножается: в куриных эмбрионах с образованием белых бляшек на хорион-аллантоисной оболочке; в культуре клеток, в цитоплазме которых формируются характерные околоядерные включения.

Резистентность. Вирусы устойчивы к высушиванию и низким температурам, нечувствительны к эфиру. Моментально погибают при 100С, а при 60С — через 15 мин.

Эпидемиология. Особо опасная конвенционная (карантинная) инфекция. Источником инфекции является больной человек, который заразен с последних дней инкубационного периода и до отпадения корок высыпаний. Инфицирование происходит воздушно-капельным, воздушно-пылевым, а также контактно-бытовым путями при соприкосновении с вещами больного, загрязненными слизью, гноем, калом и мочой, содержащими вирус.

Патогенез. Вирус проникает через слизистые оболочки верхних дыхательных путей, реже — через кожу и после размножения в регионарных лимфатических узлах попадает в кровь. Из крови возбудитель заносится в кожу и лимфоидные ткани, в которых происходит размножение вирусов, формируются очаги поражения в коже, слизистых оболочках и паренхиматозных органах. Характерно образование папулезных высыпаний.

Клиника. Инкубационный период 7—17 дней. Заболевание проявляется высокой температурой тела, рвотой, головной и поясничной болями, появлением сыпи. Первоначально сыпь имеет вид розовых пятен, которые затем переходят сначала в узелки — папулы, а затем — в пузырьки (везикулы) и пустулы, подсыхающие и превращающиеся в корки.

Различают несколько форм оспы: тяжелую (пустулезно-геморрагическая); среднетяжелую; легкую (оспа без сыпи, оспа без повышения температуры тела).

Иммунитет. После перенесенной болезни формируется стойкий пожизненный иммунитет, обусловленный появлением вируснейтрализующих антител, интерферонов и активацией факторов клеточного иммунитета.

Микробиологическая диагностика. Исследуют содержимое элементов сыпи, отделяемое носоглотки, кровь, поражённые органы и ткани. Вирус выявляют при электронной микроскопии, в РИФ, РП, по образованию телец Гварниери. Выделяют вирус путем заражения куриных эмбрионов и культур клеток с последующей идентификацией в реакции нейтрализации (на куриных эмбрионах), РСК, РТГА. Серологическую диагностику проводят в РТГА, РСК, РИГА, реакции нейтрализации.

Лечение. Симптоматическое; индукторами интерферона и противовирусными препаратами.

Профилактика. Прочный иммунитет создает живая оспенная вакцина. Ее готовят из соскобов сыпи телят или при культивировании вируса вакцины (осповакцины) на куриных эмбрионах. Вакцину вводят накожно. Разработана оральная таблетированная вакцина, менее реактогенная.

54. Вирусные теории онкогенеза. Вирусогенетическая теория возникновения злокачественных новообразований Л.А. Зильбера. Провирусы. Механизм онкогенеза, вызываемого ретровирусами. Понятие об онкогене.

Основные постулаты теории Зильбера:

1.Все известные естественно развивающиеся опухоли животных вызываются вирусами. Поэтому можно предположить, что опухоли человека также имеют вирусную природу.

2. Для вирусного онкогенеза необходима интеграция генома онкогенного вируса в клеточный геном, и это приводит к нарушению регулции размножения клеток и опухолевому росту.

3. Онкогенные вирусы являются пусковым фактором в развитии опухоли. В дальнейшем росте опухоли вирус участия не принимает, может вообще исчезнуть из клетки, или присутствовать в ней в качестве «пассажира". По выражению Л.Зильбера - " Мавр сделал свое дело, мавр может и уйти».

Теория предложена в конце 1950-х. С того времени теория обогатилась новыми фактами, подтверждающими ее основные положения.

Онкогены: Вирусные онкогены (V-onc), обычно известные как раковые гены, являются генами, которые кодируют белки, вызывающие трансформацию нормальных клеток в раковые. Онкогены не существенны для репликации вируса, и мутанты, испытывающие их недостаток, реплицируются нормально, не являясь онкогенными.

Провирус — геном вируса, встроенный в ДНК клетки хозяина. Процесс встраивания провируса в геном называют интеграцией, эта реакция катализируется ферментом интегразой.

Провирус является стадией жизненного цикла ретровирусов. Когда ретровирусы попадают в клетку хозяина, геномная РНК ретровируса обратно транскрибируется в ДНК ферментом обратной транскриптазой и встраивается в геном хозяина ферментом интегразой.

Механизм онкогенеза, вызываемого ретровирусами, связан с функционированием онкогенов (ONC-гены), которые имеются в геноме всех клеток человека и животных. Включение в геном клетки ДНК-провируса приводит к активации онкогена, который в нормальных здоровых тканях находится в неактивном состоянии. В результате активации онкогена происходит трансформация клетки.

В процессе исключения ДНК-провируса из хромосомы клетки онкоген может встроиться в вирусный геном. В составе вирусного генома онкоген находится в активном состоянии. Заражение клеток онковирусами, имеющими онкоген, приводит к трансформации клеток хозяина. Все перечисленное выше относится к так называемым экзогенным ретровирусам. Имеются еще «эндогенные» ретровирусы, которые являются составным элементом генома всех органов и тканей человека и животных и передаются от одного поколения другому. «Эндогенные» ретровирусы не являются онкогенными для представителей того вида животного, в клетках которого они находятся как постоянный генетический элемент.

В случае онкогенных ДНК-содержащих вирусов, вирусная ДНК (или ее часть) интегрирована с геномом клетки-хозяина. Вирусная ДНК, будучи неполной или «дефектной», неспособна обеспечить воспроизводство инфекционных вирусов. Однако под ее влиянием клетка-хозяин подвергается злокачественной трансформации. Трансформированная вирусом раковая клетка во многом аналогична бактерии, пораженной дефектным фагом. В обоих случаях клетка не разрушается, и вирусы не продуцируются. Приобретение новых характеристик трансформированной клеткой походит на лизогенную конверсию у бактерий. Вообще, ретровирусы вызывают развитие опухолей двумя путями - или путем внедрения в клеточный геном нового трансформирующего гена (онкогена) или, стимулируя или изменяя экспрессию существующего клеточного гена.

55. Онкогенные вирусы; классификация и характеристика.

РНК-содержащие: семейство Retroviridae.

ДНК-содержащие: семейства Papillomaviridae, Polyomaviridae, Adenoviridae 12, 18, 31, Hepadnaviridae, Herpesviridae, Poxviridae

РНК-содержащие:

Семейство Retroviridae включает 7 родов.

Онковирусы являются сложноорганизованными вирусами. Вирионы построены из сердцевины, окружённой липопротеиновой оболочкой с шипами. Размеры и формы шипов, а также локализация сердцевины служат основой для подразделения вирусов на 4 морфологических типа (А, В, С, D), а также вирус бычьего лейкоза.

Капсид онковирусов построен по кубическому типу симметрии. В него заключены нуклеопротеин и фермент ревертаза. Ревертаза обладает способностью транскрибировать ДНК. Геном – 2 идентичные цепи РНК.

Культивирование вирусов: не культивируются на куриных эмбрионах, культивируются в организме чувствительных животных, в культурах клеток.

Репродукция вирусов: проникают в клетку путем эндоцитоза. 3 этапа: синтез ДНК, на матрице РНК; ферментативное расщепление матричной РНК; синтез комплементарной нити ДНК на матрице первой нити ДНК.

К семейству Retroviridae относится примерно 150 видов вирусов, вызывающих развитие опухолей у животных, и только 4 вида вызывают опухоли у человека: HTLV-1, HTLV-2, ВИЧ-1, ВИЧ-2.

Вирусы Т-клеточного лейкоза человека

К семейству Retroviridae роду Deltaretrovirus относятся вирусы, поражающие CD4 Т-лимфоциты, для которых доказана этиологическая роль в развитии опухолевого процесса у людей: HTLV-1 и HTLV-2

Вирус HTLV-1 является возбудителем Т-клеточного лимфолейкоза взрослых. Он является экзогенным онковирусом, который, в отличие от других онковирусов, имеет два дополнительных структурных гена: tax и rех.

Пр<