Методы культивирования анаэробных бактерий

Культивирование анаэробных бактерий как спорообразующих (клостридии – возбудители столбняка, ботулизма и газовой гангрены), так и неспорообразующих (вейлонеллы, бактероиды и др.) производят в анаэробных условиях (в отсутствии О₂).

Анаэробные условия можно создать следующими методами: физическим, химическим, биологическим.

Физические методы

1.Механическое удалениеО₂ с заменой его на инертный газ (в анаэростатах) (рисунок 25).

2.Использование специальных жидких питательных сред. Например, среда Китта–Тароцци, содержащая МПБ, ,5% глюкозы и кусочки печени или мясного фарша, необходимые для адсорбции кислорода. Перед посевом кислород из среды Китта–Тароцци удаляют кипячением, охлаждают, производят посев материала, после чего поверхность среды заливают стерильным вазелиновым маслом или парафином. Пробирки закрывают стерильными резиновыми пробками.

Рис.25 Анаэростат для культивирования анаэробных бактерий.

Химические методы

1. Применение поглотителей О₂, таких как щелочной раствор пиргалола на дне эксикатора, в котором на подставку помещают чашки Петри с посевами (рисунок 26).

2. Использование «GasPak – системы» – упаковки, содержащей различные химические соединения, способные в результате взаимодействия с Н₂О, связывать О₂ в герметично закрытых ёмкостях, в которые помещают посевы в чашках Петри или пробирках. Этот метод применяют для выращивания аэротолерантных бактерий (рисунок 27).

3. Использование зажженной свечи на дне анаэростата или эксикатора.

Рис. 26 Виды эксикаторов

Рис. 27 GasPak - системы