КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ВИРУСОВ

В вирусологической практике для репродукции вирусов с диагностическими целями используются организмы чувствительных животных, куриные эмбрионы и культуры клеток, полученные из нормальных и злокачественных клеток людей и животных.
Культивирование вирусов помогает решить ряд теоретически проблем, связанных с изучением особенностей взаимодействия "вирус-клетка". Кроме того, решение целого ряда прикладных задач, связанных с диагностикой и производством препаратов для профилактики вирусных инфекций невозможно без накопления вируссодержащего сырья.

Вирусологические методы исследования.

Содержание:

· Лабораторные методы диагностики вирусных инфекций.

· Практическое применение бактериофагов

ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ

Различные инфекции могут проявляться в организме больного в очень сходных симптомах, и в тоже время клиническая картина инфекции, вызванная определенным вирусом, может быть весьма разнообразной по своей симптоматике.
Определить возбудителя, особенно при тяжелых заболеваниях, важно и для прогноза дальнейшего течения болезни, установления ее отличий от неинфекционных заболеваний со сходными симптомами и выбора правильного способа лечения. Быстрая лабораторная диагностика позволяет провести неотложные и правильные противоэпидемические мероприятия и обнаружить источник вирусной инфекции.

Лабораторные методы при диагностике вирусных инфекций включают:

· выделение и идентификацию возбудителя;

· обнаружение и определение титров противовирусных антител;

· обнаружение антигенов вирусов в образцах исследуемого материала;

· микроскопическое исследование препаратов исследуемого материала.

Забор материала. При заборе материала для исследований необходимо выполнять следующие условия:

· образцы следует отбирать как можно раньше либо с учетом ритма циркуляции возбудителя;

· материал следует отбирать в объеме, достаточном для всего комплекса исследований;

· образцы следует доставлять в лабораторию незамедлительно (!), при относительно кратковременной транспортировке (не более 5 сут) образцы сохраняют на льду, при более длительной - при температуре -50°С.

Выделение и культивирование вирусов

Вирусы размножаются только в живых клетках. В лаборатории их культивируют в культурах клеток, куриных эмбрионах или организмах чувствительных животных.

Для диагностики вирусных заболеваний применяют следующие методы:

· Вирусоcкопический.

· Иммунной электронной микроскопии.

· Вирусологический.

· Серологический.

· Иммунофлюоресцентный.

· Биологический.

· Использование ДНК-(РНК)-зондов.

· Цепная полимеразная реакция.

Рис. 1. Для лабораторной диагностики вирусных инфекций чаще используют серологические методы исследования.

Идентификация вирусов

Идентификацию вирусов проводят качественным и количественным определением вирусов, по морфологии вирусов и с помощью серологических методов.

Рис. 2. Герпесвирус (слева), вирус гепатита В (справа) электронная микроскопия.

Рис. 3. Вирус гриппа (слева), вирус иммунодефицита человека (справа) электронная микроскопия.

ПРАКТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ БАКТЕРИОФАГОВ

В практической работе фаги применяют для:

· фаготипирования бактерий, т.е. определения фаготипа по лизису штаммов бактерий одного и того же вида типоспецифическими фагами, что важно для маркировки исследуемых при эпидемиологическом анализе заболеваний с целью установления их видовой принадлежности;

· фагодиагностики, заключающейся в выделении фага из организма больного (например, из испражнений), что косвенно свидетельствует о наличии в материале соответствующих микроорганизмов;

· фагопрофилактики - предупреждения некоторых заболеваний (например, дизентерии) среди лиц, находящихся в эпидемическом очаге;

· фаготерапии - лечения некоторых инфекционных заболеваний, вызванных, например, шигеллами, протеем, стафилококком.

Бактериофаги с целью терапии применяют местно путем аппликации на раневую или ожоговую поверхность, введением в полости(брюшную, плевральную, суставную, мочевой пузырь), через рот, а также ректально.
Соответственно способу применения препараты бактериофагов выпускают в различных лекарственных формах –

· жидком виде,

· таблетках с пектином или кислотоустойчивым покрытием,

· мазях,

· свечах,

· аэрозолях.

Рис. 4. Бактериофаг кишечной палочки (электронная фотография).