Субстратное ингибирование
Для многих ферментативных реакций при увеличении концентрации субстрата начальная скорость ферментативной реакции проходит через максимум, а затем уменьшается. Подобного рода зависимость можно описать, исходя из предположения об образовании в процессе реакции непродуктивного тройного комплекса ЕS2. В этом случае кинетическая схема ферментативной реакции выглядит следующим образом:
Зависимость скорости реакции от концентрации субстрата после математической обработки этой схемы имеет вид:
(11)
Где К′s – субстратная константа, учитывающая сродство фермента ко второй молекуле субстрата. Анализ этого уравнения, как и уравнения Михаэлиса-Ментен, целесообразно проводить раздельно в области низких ([S] < Кs´) и высоких ([S] ˃ Кm ) концентрациях субстрата.
При низких значениях концентрации субстрата уравнение упрощается до классического уравнения Михаэлиса-Ментен (рис. 2.3.16а), при линеаризации которого можно определить Кm, Vmax, kcat (k+2 ).
В области высоких концентраций субстрата уравнение принимает вид:
(12)
Линеаризация этого уравнения в координатах (1/v, [S]) позволяет определить Vmax и Кs´ (рис.2.3.16б).
а) б)
Рис. 2.3.16. Линеаризация уравнения (12) в координатах (1/v 1/[S]) –а) и (1/v ; [S]) – б)
Зная величины Кm и Кs´, можно рассчитать оптимальную концентрацию субстрата по формуле:
(13)
Дата добавления: 2020-10-01; просмотров: 422;