Получение подходящих кристаллов

Для рентгеноструктурного анализа нужно иметь кристалл подходящей геометрии и размера (рис 2). Изначально обычно используют концентрацию белка в диапазоне 2-50 мг/мл. Желательно, чтобы белок или вирус не содержали значи­мого количества примесей, таких как другие белки или вирусы, их фрагменты, развернутые или неправильно свернутые белки, посторонние частицы, химические добавки. В большинстве случаев лучше кристаллизуются компактные белки, которые не содержат гибкие концы. Подходящие кристаллы имеют размеры в несколько десятых долей миллиметра (> 0,1 мм).

Таблица 1. Физические свойства природных аминокислот

Рис. 2. Основная схема рентгенокристаллографического анализа белков. Из измерений дифракционной картины нативного кристалла, а если нужно, то и кристалла, замещенного тяжелым атомом, вычисляется электронная плотность, и строится атомная модель. Исходная модель уточняется, например, путем ее модификации до тех пор, пока вычисленная дифракционная картина не совпадет с измеренной картиной.

Рис. 3.Роботизированная установка для кристаллизации в подвешен­ных каплях. Под контролем компьютера смеситель отбирает из флаконов различные растворы, смешивает их в различных отношениях и помещает эти смеси на стеклянную пластину.