Принципиальная схема получения ферментных препаратов


Схема очистки фермента от балластных веществ сводится к освобождению его от нерастворимых веществ, сопутствующих растворимых веществ и других ферментов. Процессы получения очищенных препаратов из поверхностных и глубинных культур несколько различны. Из поверхностных культур труднее получить высокоочищенные препараты из-за большого количества балластных веществ. Из глубинных культур получить очищенные препараты несколько легче, но при этом приходится вести выделение из разбавленных растворов, если выделение ферментов проводится из жидкой части культуры. Выделение осложняется, если фермент внутриклеточный, и тогда необходимо разрушать клетки микроорганизмов.

Принципиальную схему выделения и очистки ферментов из глубинных и поверхностных культур микроорганизмов можно изобразить в виде представленной на странице 90 схемы.

Из схемы ясно, что экстракт из поверхностной культуры или фильтрат культуральной жидкости является исходным материалом для получения препаратов ферментов различной степени очистки. На первом этапе выделения отходом процесса является нерастворимая часть культуры - биошрот, содержащий нерастворимые включения среды и биомассу продуцента.

Далее в зависимости от свойств выделяемого фермента и сопутствующего ему балласта схема очистки и получения ферментного препарата может включать различные приемы и методы, такие как концентрирование, диализ, осаждение органическими растворителями, солями, гель-фильтрование, афинная хроматография, иммобилизация, сушка термолабильных материалов и т. д. Поэтому первоначально рассмотрим получение технических ферментных препаратов, а затем без особого акцента на поверхностный или глубинный способ культивирования более сложные способы очистки и выделения ферментов.

Принципиальная схема получения очищенных ферментных препаратов из культур микроорганизмов

……????????????????????…………………..

 


 

Таблица 1 .10

Стадия очистки Объем, мл Общее количество белка, мг Глюкозамилазная активность Амилолитическая активность Трансглюко-зидазная активность*
общая, ед удельная, ед/мг белка выход, % степень очистки общая, ед выход, %
Исходная культуральная жидкость 2,1 100,0 1,0 Глюкоза, изомальтоза, паноза
Отделение биомассы, концентрирование, отделение балласта 2,3 90,0 1,1 89,00   То же
Осаждение ацетоном, растворение в воде 9,7 69,5 4,6 11,30     »
Ультрафильтрация 11,3 64,0 5,4 9,10 »
Хроматография на ДЭАЭ-целлюлозе 50,4 52,5 30,0 0,35   Нет
Ультрафильтрация 54,0 47,2 25,7 27,5 0,29 »
Гель-фильтрование через акрилекс П-100 76,5 40,5 36,5 22,8 0,24   »
Обессоливание, лиофилизация 0,1** 77,0 25,0 37,0 14,3 0,15   »

 

* Характеризуется хроматографически по наличию изосахаров.

** Выражено в г.




Дата добавления: 2018-05-10; просмотров: 1446;


Поиск по сайту:

Воспользовавшись поиском можно найти нужную информацию на сайте.

Поделитесь с друзьями:

Считаете данную информацию полезной, тогда расскажите друзьям в соц. сетях.
Poznayka.org - Познайка.Орг - 2016-2024 год. Материал предоставляется для ознакомительных и учебных целей.
Генерация страницы за: 0.007 сек.